醫學(xué)檢驗論文選題
1.1性狀鑒別

蛇膽的性狀鑒別是根據膽囊的外形特征、色澤、大小、質(zhì)地、膽蒂位置、膽管(形狀、長(cháng)度及韌性)、膽汁稠度、氣味等進(jìn)行比較的鑒別方法。蔣碧英[5]描述了正品蛇膽的性狀鑒別要點(diǎn);張穗[3]對14種蛇膽及其常見(jiàn)偽劣品進(jìn)行了外觀(guān)性狀鑒別。這種傳統手段簡(jiǎn)單方便,可直觀(guān)地將蛇膽與一般偽品區別開(kāi)來(lái),在早期藥材收購、加工部門(mén)的現場(chǎng)鑒定中較常使用;但由于蛇膽的形態(tài)學(xué)特征往往因加工方法和條件不同而變化,鑒別效果因人不同(經(jīng)驗、主觀(guān)影響等),因蛇而異(蛇的種類(lèi)、大小、生理狀態(tài)等),因觀(guān)察環(huán)境(季節、光線(xiàn)等)而變化,誤差較大,現階段僅作為真偽鑒別的參考指標。
1.2顯微鑒別
根據蛇膽的組織殘片、細胞或內含物等特征進(jìn)行顯微鑒別是蛇膽原藥材鑒別的方法之一。楊育民等[6]依據蛇膽內含物的形狀、大小及顏色等顯微特征鑒別了蛇膽及其偽充品鑒別;陸惠文[7]根據蛇膽與偽品等各自的組織學(xué)特點(diǎn)將待檢膽囊標本制成石蠟切片,經(jīng)HE染色和顯微觀(guān)察,鑒別了蛇膽(眼鏡蛇、金環(huán)蛇、灰鼠蛇等)與偽品蛇膽(雞膽、青魚(yú)膽等)。該法雖鑒別效果較好且簡(jiǎn)便,但僅適用于仍保留有顯微特征的原料藥材和成藥。由于膽的內含物隨著(zhù)蛇的生理狀態(tài)不同而有差異,組織學(xué)特征也因切片的取材位置不同而不同,因此增加了鑒別的難度;此外,目前大多數含蛇膽成藥不保留蛇膽的顯微特征,故此法不宜推廣。
1.4分子生物學(xué)鑒定
由于蛇膽保存和制劑加工過(guò)程中的處理方法往往破壞了蛇膽的完整性,因此依據性狀、顯微特征及理化性質(zhì)進(jìn)行鑒別有一定困難,分子生物學(xué)方法能克服上述問(wèn)題,呈現更客觀(guān)的結果。眾所周知,物種的多樣性是基因多態(tài)性的結果,而基因多態(tài)性可在分子水平上檢測,它比在形態(tài)、組織和化學(xué)水平上檢測更能代表其變異類(lèi)型的遺傳標記。王義權等[21]將分子標記技術(shù)運用到蛇類(lèi)藥材的鑒定研究中,對游蛇科10種蛇基因組DNA的多態(tài)性進(jìn)行了分子遺傳標記的研究;通過(guò)提取金錢(qián)白花蛇及其偽品藥材和原動(dòng)物樣品的模板DNA,分析其Cytb基因片斷鑒別了金錢(qián)白花蛇[22];
沈曦等[23]通過(guò)比較12SrRNA和Cytb基因的部分序列鑒別了幾種蝮屬蛇類(lèi);劉向華等[24]從藥材蛇膽的膽衣和膽汁、原動(dòng)物棕黑錦蛇的肌肉和膽汁中提取DNA,經(jīng)PCR擴增12SrRNA基因片段,鑒別了蛇類(lèi)藥材。分子生物學(xué)鑒別方法雖能有效鑒別出蛇類(lèi)藥材的種屬來(lái)源,目前在蛇類(lèi)藥材的鑒別中應用較廣,但由于市售蛇膽樣品的復雜性,蛇膽DNA的含量較低,故此法在蛇膽鑒別中的應用較少,具體應用方案還有待于進(jìn)一步完善。
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