芻議醫學(xué)檢驗中現代分子生物學(xué)技術(shù)的作用論文
摘要：從近幾年分子生物學(xué)方法的運用來(lái)看，以核酸生化作為基礎的新技術(shù)成為了當前醫學(xué)檢驗的最新方法，在醫學(xué)檢驗領(lǐng)域上得到了廣泛的應用。筆者在前人相關(guān)研究的基礎上，結合自己的實(shí)際工作經(jīng)驗和認識，談?wù)劮肿由飳W(xué)中的幾個(gè)相關(guān)技術(shù)，希望讀者可以加深對此的認識和了解。
關(guān)鍵詞：醫學(xué)檢驗；分子生物傳感器；分子蛋白組學(xué)；分子生物芯片技術(shù)
在基因克隆技術(shù)日漸完善和基因測序工作日益完善的背景下，迎來(lái)了基因時(shí)代。到20世紀末生物學(xué)領(lǐng)域中的數理科學(xué)應用大大增加，在功能基因組學(xué)、環(huán)境基因組學(xué)和結構基因組學(xué)的共同發(fā)展的態(tài)勢下，分子診斷學(xué)技術(shù)也得到了突破性的進(jìn)展，為檢驗醫學(xué)開(kāi)拓了更為廣闊的發(fā)展空間。
1分子生物傳感器的應用
對于分子生物傳感器而言，其主要是通過(guò)一定的化學(xué)或者生物技術(shù)，把諸如蛋白、抗原、抗體、受體、微生物、細胞、酶等生物識別元件固定在換能器上面，在待測物與生物識別元件產(chǎn)生特異性作用后，以換能器作為媒介，將其作用產(chǎn)生后的結果進(jìn)一步轉化為能夠檢測和輸出的光信號和電信號等，再對待測物質(zhì)進(jìn)行更全面的定性和定量分析，達到檢測分析的要求。在實(shí)際工作中，體液中的微量蛋白、核酸和小分子有機物等物質(zhì)的檢測都需要分子生物傳感器。生物傳感器的存在對于處于手術(shù)中和重癥監護下的患者來(lái)說(shuō)，具有重要的意義。Skladal等相關(guān)學(xué)者利用通過(guò)寡核苷酸探針修飾過(guò)的壓電傳感器對丙型肝炎病毒進(jìn)行檢測，同時(shí)還對其DNA結構轉錄和聚合酶鏈式反應的擴增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的監測，而整個(gè)檢測過(guò)程僅僅需要10min，除了監測耗時(shí)較短外，該裝置還具有可以重復使用的特點(diǎn)[1]。Petricoin等相關(guān)學(xué)者利用壓電傳感器對破骨細胞生成抑制因子和幾種抗體的相互影響進(jìn)行了更深入的研究，并從中成功研發(fā)出能夠迅速檢驗血清中OPG的壓電免疫傳感器[2]。Drosten等學(xué)者則報道了檢測神經(jīng)遞質(zhì)的酶電報，將電極放置在神經(jīng)肌肉接點(diǎn)附近可實(shí)時(shí)測定并記錄鄰近的神經(jīng)元去極化后所釋放的遞質(zhì)谷氨酸[3]。
2分子蛋白組學(xué)的應用
對于分子蛋白組學(xué)的研究，在相關(guān)領(lǐng)域上可以說(shuō)取得了驕人的成績(jì)，但是也存在相當一部分結論是眾說(shuō)紛紜和互相矛盾。對于一些典型的腫瘤標志物來(lái)說(shuō)，其難以在當前通過(guò)表面增強激光解析離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)作為代表的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)來(lái)得到充分體現。筆者查閱相關(guān)的問(wèn)題總結出可能存在以下幾個(gè)方面的問(wèn)題：首先就是激光解析離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)自身存在一定的限制性，具體包括重復性、敏感性和每個(gè)峰值蛋白在當前設備下確認所存在的弊端；其次就是要考慮實(shí)驗設計和對照組是否選擇得當，對于某個(gè)特定的蛋白組模式所反映的是腫瘤的特異性、代謝紊亂還是炎癥反應等都難以得到準確的結論；最后就是對于不同實(shí)驗室所產(chǎn)生的實(shí)驗結果，其標本處理存在一定的差異，導致其可比性大為降低，我們在實(shí)際工作中，只有重視并有效解決上述問(wèn)題，激光解析離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)在檢驗醫學(xué)中才能發(fā)揮中應有的作用。
3分子生物芯片技術(shù)的應用
隨著(zhù)分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，人們對于各種不同類(lèi)型的疾病認識也有加深，傳統的醫學(xué)檢驗技術(shù)顯然難以，滿(mǎn)足當前醫學(xué)界上準確、迅速、和低耗的要求。分子生物芯片指的是把大量探針?lè )肿庸潭ㄔ谥С治锷�，然后與有所標記的樣品進(jìn)行反應，根據自動(dòng)化儀器所檢測出來(lái)的反應信號強度來(lái)對樣品中靶分子數量進(jìn)行判斷。從病原菌檢測的角度來(lái)分析，由于相當一部分病毒和細菌的基因組測序已經(jīng)完成，并且把很多代表著(zhù)每種微生物的特殊基因集成1張芯片�？梢愿鶕崔D錄來(lái)對標本中是否存在病原體基因的表達進(jìn)行檢測，同時(shí)還能夠檢測出其表達的情況，進(jìn)一步分析病原體對患者感染程度和宿主的具體反應。
4分子生物納米技術(shù)的應用
以抗體作為基礎技術(shù)是生物活性物質(zhì)檢測多種方法中較為重要的一種。免疫分析結合磁性修飾的技術(shù)已經(jīng)在各種生物活性物質(zhì)和異生質(zhì)物質(zhì)檢測中得以廣泛的應用。其原理是通過(guò)把抗原或者特異性抗體固定在納米刺球表面，并利用放射性同位素、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)、酶或者是熒光染料等基礎物質(zhì)所產(chǎn)生的檢測與過(guò)去常用的微量滴定板技術(shù)進(jìn)行比較，則表現出簡(jiǎn)單、快捷的優(yōu)點(diǎn)。有相關(guān)學(xué)者把抗體連接起來(lái)的納米磁性微球與特定的自動(dòng)檢測系統相結合起來(lái)，并將其成功地運用在血清中人免疫缺陷病毒1型和2型抗體。除此之外，目前全自動(dòng)夾心法免疫測定技術(shù)已經(jīng)成功在胰島素檢測中得到運用，當中也涉及到抗體、蛋白納米磁性微粒復合物和堿性磷酸酶標記二抗。
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