膽結石的形成機理及成分分析論文
摘 要:膽結石是臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病。人體膽結石的成份非常復雜,膽結石的主要成分為膽固醇和膽紅素。了解膽結石的成因和發(fā)病機理,將引導我們找到治療膽結石的科學(xué)方法。膽結石的成分分析,是有效治療膽結石的重要前提。

關(guān)鍵詞:膽結石 發(fā)病機理 定性分析 定量分析
引言
近年來(lái)應用紅外光譜法結合化學(xué)分析方法將膽結石進(jìn)行分類(lèi),找出快速鑒定膽石類(lèi)型的途徑,以便對癥治療,在臨床的應用越來(lái)越普遍,F代的傅立葉變換紅外光譜法有快速、分辨率高等優(yōu)點(diǎn),可用于膽結石的分類(lèi)和快速檢定分析。
1 膽結石的分類(lèi)
按結石發(fā)生部位不同,分為膽囊結石、肝內膽管結石、膽總管結石[2]。按結石化學(xué)成分不同,通常包括膽固醇結石、膽色素結石或二者的混合物,即混合型結石。
1.1 膽固醇結石
外觀(guān)呈白色,通常是圓形或卵圓形,表面光滑或呈顆粒狀。此類(lèi)結石多發(fā)生在膽囊內,由于膽固醇結石的發(fā)生與代謝有關(guān)系,故又稱(chēng)之為代謝性結石。
1.2 膽色素結石
多數以膽紅素鈣為主。其中黑色素結石的外觀(guān)不定型、表面光滑、質(zhì)地堅硬,主要成分是色素聚合物、硫酸鈣、磷酸鈣,多發(fā)于膽囊內[4];膽色素鈣常呈棕黃色小顆粒狀,質(zhì)地松軟,主要成分是膽固醇、膽色素鈣、脂肪酸鈣,多發(fā)生于膽管內。
1.3 混合性結石
主要成分也是膽固醇、膽色素、鈣鹽,其外形呈多面角形,表面光滑,呈深綠色或棕黃色顆粒,往往數目較多,排列整齊,其切面多呈環(huán)層狀,亦多發(fā)生于膽囊內。
2 膽結石的主要成分
人體膽結石的成分非常復雜,膽結石的主要成分為膽固醇和膽紅素,此外還含有磷脂、蛋白、膽酸、游離脂肪酸及鈣、鎂等無(wú)機元素[3]。根據其膽固醇和膽紅素含量不同,膽石可分為膽固醇型及膽色素型等不同類(lèi)型。
3 膽結石的成因及發(fā)病機理
人體內大量的膽固醇來(lái)源于各組織的形成,只有小部分是來(lái)源于食物中。形成膽固醇結石的主要物質(zhì)基礎是膽汁的過(guò)量飽和。假如膽汁內含有過(guò)高的膽固醇,膽汁就會(huì )很黏稠,長(cháng)期留在膽囊內沉淀成硬塊而形成膽結石[6]。
肝膽對膽固醇的合成越多,膽固醇變成膽汁酸的速度就越慢,這樣膽固醇太過(guò)于飽和,就會(huì )與膽汁酸比例失調。這種狀態(tài)持續下去會(huì )發(fā)生阻塞性黃疸,過(guò)量的膽汁酸進(jìn)入人體,通過(guò)體內循環(huán),膽汁酸會(huì )增多,就會(huì )有過(guò)多的膽汁酸排除體外,從而造成腸肝循環(huán)減慢,膽固醇的溶存度也因此而降低。濃縮的膽汁,由于很黏稠,排除受到極大阻礙,長(cháng)時(shí)間淤積在一起,膽汁成分比例就開(kāi)始失常。由于膽固醇含量高容易在膽囊粘膜上沉積,影響膽囊中黏蛋白的分泌,黏蛋白可以把膽固醇結晶和膽紅素鈣較強地黏合在一起,更易于形成膽結石[1]。
4 膽結石成分的定性分析
4.1 化學(xué)分析法
膽結石中的膽固醇及膽紅素對特定的化學(xué)試劑有不同的顏色反應,利用反應后的顏色深淺或其他變化來(lái)大致檢測膽同醇和膽紅素的含量對膽結石進(jìn)行分類(lèi),方法簡(jiǎn)易快速、結果可靠,適于一般臨床工作中的膽結石快速分類(lèi)。
4.2 紅外光譜法
膽結石的主要成分膽固醇和膽紅素都有非常特征的紅外光譜,用紅外光譜法很容易鑒別。紅外光譜似化合物的指紋,可不改變混合物的體系組成進(jìn)行成分分析。而膽結石未加分離情況下的紅外光譜是膽結石內各成分吸收峰的機械疊加,根據吸收峰的峰位、強度、形狀與標準品紅外光譜圖或對照圖譜比較,即可判斷膽結石的主要成分。
4.3 電子自旋共振譜(ESR或EPR)分析法
鑒于膽結石中含有的過(guò)渡金屬離子及膽色素類(lèi)組分都可能有ESR信號,有人做了膽結石ESR譜的初步研究,表明色素型結石有其獨特的ESR譜,而膽固醇型結石中的膽紅素類(lèi)物質(zhì)和過(guò)渡金屬離子含量都很少,因而這類(lèi)膽結石沒(méi)有或只有很弱的ESR信號,故ESR譜可用來(lái)區別膽結石類(lèi)型[3]。
5 膽結石成分的定量分析
5.1 膽結石中膽固醇含量測定[2]
5.1.1 化學(xué)法
用乙醚從膽結石中提取出膽固醇,蒸干后加無(wú)水乙醇溶解,加入硫酸鐵顯色劑,膽固醇與三價(jià)鐵形成紫紅色化合物,550 nm波長(cháng)下比色法測定,與同樣處理之標準品比較,即可求得膽結石中膽固醇的含量。
5.1.2 薄層掃描法
膽結石粉末用氯仿一無(wú)水乙醇(35:15)另加1滴濃鹽酸溶解后,在高效硅膠薄層板上點(diǎn)樣,以二甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(1.6:0.2:0.1)作展開(kāi)劑,用50% 硫酸乙醇液顯色后于薄層掃描儀上掃描。
5.1.3 傅立葉變換紅外光譜法
在有機化合物儀器分析中,應用紅外光譜分析方法的特點(diǎn),可進(jìn)行各種氣體、液體和固體的定量分析 。應用紅外光譜技術(shù)對膽結石進(jìn)行定性、定量分析,可不經(jīng)分離而直接測定,亦可避免加入其他化學(xué)物質(zhì)的影響。
5.2 膽結石中膽紅素含量測定
5.2.1 重氮化法
膽結石中的膽紅素經(jīng)鹽酸浸泡后,才能被氯仿溶解而提取出來(lái),被提取出來(lái)的膽紅素與歐立區重氮試劑偶氮化,形成偶氮膽紅素,呈紅色,溶于甲醇中,于540 nm波長(cháng)處比色測定,與同樣處理的標準管比較.即可求得膽結石中膽紅素的含量 。
5.2.2 分光光度法
該法采用醋酸-氯仿(1:4)為溶媒,把膽結石直接溶解即可得透明液,在453 nm波長(cháng)處測定吸收度。結果表明本法線(xiàn)性關(guān)系良好,精密度、回收率和穩定性也都令人滿(mǎn)意,且方法較重氮化法更為簡(jiǎn)便易行。
5.2.3 傅立葉變換紅外光譜法
前面已提到應用紅外光譜法可根據膽結石中各種分離成分的特征進(jìn)行定性,對于定量分析可選取不相干擾的特征峰或干擾小的特征峰進(jìn)行測定。
參考文獻
[1]宋薏芳等.傅立葉變換紅外光譜技術(shù)及應用研討會(huì )論文集(-),海洋出版社,1993,102-110
[2]張洪昌等.膽紅索,膽素生產(chǎn)技術(shù).科學(xué)技術(shù)文獻出版社出版.1998(10)
[3]王君,韓建濤,張揚. 膽結石治療方法研究的現狀與展望[J]. 右江醫學(xué),2002,30(6):521-522.
[4]吉毅崢,簡(jiǎn)文豪,劉英棣. 膽結石直接溶石術(shù)的現狀和進(jìn)展[J]. 中華超聲影像學(xué)雜志,2002,11(2):117-119.
[5]李晶石,杜麗絹. 膽結石溶石治療[J]. 吉林醫學(xué)院學(xué)報,1999,199(1)
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