生物論文學(xué)術(shù)
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生物論文學(xué)術(shù)【1】
荔枝果肉多糖之分離純化與結構表征、抗氧化活性研究
第一章 緒 論
1.1 引言
荔枝(Litchi chinensis Sonn)屬無(wú)患子科，古稱(chēng)荔枝、離支、麗支，果實(shí)成熟時(shí)果皮紅艷誘人，故又俗稱(chēng)丹荔;果肉(實(shí)際上是荔枝的假種皮)為白色、半透明、香甜多汁、柔軟而脆[3]。
荔枝為廣東四大名果之一，俗有“嶺南果王”之稱(chēng)，具有較高的營(yíng)養價(jià)值和多種滋補養顏效果，一直被視為“果中珍品”。
我國是世界上栽培荔枝最早的國家，已知有 100 多個(gè)品種。
目前，亞熱帶地區氣候和土壤合適的地方都有荔枝種植[4]，我國荔枝栽培主要在廣東、海南、廣西、四川、福建、云南、臺灣等省區。
在國外，越南、老撾、斯里蘭卡、印度尼西亞、波多黎各、菲律賓、毛里求斯、馬爾加什、南非、古巴等也產(chǎn)荔枝，但都是直接或間接從我國引入栽培的[5-6]。
2007 年廣東荔枝種植面積 400 萬(wàn)畝，產(chǎn)量達到 96 萬(wàn)噸，2008 年種植面積 413 萬(wàn)畝，產(chǎn)量達到 91 萬(wàn)噸，產(chǎn)量占全國總產(chǎn)量的 60%，面積為全國種植面積的一半[7]。
但是荔枝不耐貯藏，采后短時(shí)間內極易發(fā)生褐變和腐爛變質(zhì)，加之產(chǎn)量的大幅增加與貯藏、運輸和市場(chǎng)方面的制約，往往造成大量鮮果因未及時(shí)處理而敗壞，屢屢出現豐產(chǎn)不豐收的現象。
所以，開(kāi)展荔枝精深加工，開(kāi)發(fā)荔枝功能性食品已迫在眉睫，這對于提高廣東省農業(yè)生產(chǎn)效率，推動(dòng)荔枝產(chǎn)業(yè)的持續發(fā)展具有重要意義。
本章闡述了荔枝及荔枝果肉多糖研究現狀、國內外多糖研究進(jìn)展并簡(jiǎn)要介紹了本課題的研究意義和研究?jì)热荨?/p>
1.2 荔枝及荔枝果肉多糖的研究進(jìn)展
荔枝具有很高的營(yíng)養和藥用價(jià)值，據《開(kāi)寶本草》記載，荔枝可止渴、美容。
荔枝全身都可入藥，荔枝樹(shù)根(行氣止痛、固腎澀精)、樹(shù)皮(疏肝解郁、祛風(fēng)健胃)、樹(shù)枝(治虛喘)、葉(解暑消滯、收濕斂瘡)、
花(治喉痹腫痛)、果殼(治血崩)、果核(行氣散結、祛寒止痛) 均可藥用，荔枝果肉則是嶺南佳果之一，適量食用，有補脾、益肝、養血、悅顏之功效[8]。
結合本課題我們主要討論有關(guān)荔枝果肉營(yíng)養成分和果肉多糖功能的研究概況。
1.2.1 荔枝果肉營(yíng)養成分
荔枝果實(shí)中含有大量的糖分、維生素C、磷、鈣以及少量的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素B等營(yíng)養物質(zhì)，荔枝果肉中礦物質(zhì)元素含量也較豐富。
研究認為荔枝中的酸主要是蘋(píng)果酸、琥珀酸和檸檬酸[9]，而另有報道在荔枝果肉中采用相同的方法沒(méi)有發(fā)現琥珀酸[10]。
荔枝果實(shí)的糖/酸比較高，存在品種差異，妃子笑為 65.7，糯米糍高達 92.3[10]。
Chyau等[11]發(fā)現荔枝果肉的香氣成分由游離態(tài)和結合態(tài)兩種形態(tài)組成，游離態(tài)氣味成分主要有三羥基-2-丁酮(30.1%)，香葉醇(15.6%)等;結合態(tài)氣味成分主要為香葉醇(73.7%)和香葉醛(7.95%)。
刑其毅等[12]用冷凍收集法收集到的荔枝果肉頭香水溶液研究荔枝香味成分，鑒定出 34 種香味成分，主要成分有醋酸、異戊醇、醋酸甲酯等。
荔枝果肉含有豐富的蛋白質(zhì)和氨基酸[13];荔枝汁中氨基酸種類(lèi)齊全(17 種)、含量高，每 100mL含 136.44mg氨基酸，
除色氨酸外，含有人體所必需的 4 種氨基酸;總氨基酸中必需氨基酸的含量高達 44%，其中天冬氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、蛋氨酸含量較高[14]。
有關(guān)荔枝果肉的功能性有效成分的研究，國內外都有報道。
日本學(xué)者M(jìn)inakata等報道荔枝果肉提取物在抗誘變方面具有較好的效果。
Shela等[15]研究發(fā)現荔枝鮮果中總的多酚含量為 3.35mg/100g鮮果，五倍子酸的含量為 307.2 ug/100g鮮果，這些成分可能對人體有保健功能。
第二章 不同荔枝品種多糖含量及不同干燥方法對其抗氧化活性的影響
2.1 引言
荔枝品種是由來(lái)自一個(gè)實(shí)生單株的營(yíng)養繁殖系的群體組成。
通常認為生產(chǎn)種植廣、栽培面積大、產(chǎn)量較高、適應性較強、品質(zhì)較好的品種為優(yōu)良品種。
荔枝品種在生產(chǎn)上具有一定的經(jīng)濟價(jià)值，且遺傳組成基本相同，遺傳性狀穩定。
廣東省作為我國荔枝的第一產(chǎn)區，種質(zhì)資源之豐富為世界鮮見(jiàn)[1]，目前已經(jīng)收集和記載的優(yōu)良品種、品系和單株就有 200 個(gè)以上，
其中作為商品性生產(chǎn)栽培面積 2000 畝以上的主栽品種就有 26 個(gè)，包括：三月紅、白糖罌、白蠟、狀元紅、園枝、大造、進(jìn)奉、妃子笑、黑葉、懷枝、桂味、糯米糍、掛綠、雪懷子、紅糯、香荔、尚枝等[2]。
目前還沒(méi)有關(guān)于荔枝多糖含量與品種差異的報道，而且荔枝在品種上存在同名異物，同物異名及多名的現象比較嚴重。
所以，本章從廣東省果樹(shù)研究所荔枝資源庫中選取經(jīng)果樹(shù)所專(zhuān)家鑒定的在廣東省主栽的 21 個(gè)荔枝品種，研究其活性成分，以期弄清楚廣東地區主栽荔枝品種間多糖含量的差別，為后續研究材料的選取提供依據。
荔枝生產(chǎn)季節比較集中，不容易保藏，所以大量荔枝需要通過(guò)加工消化。
目前，荔枝加工主要是荔枝干，占全部荔枝加工品的 80%以上[3]。
傳統荔枝干的加工方法主要有日曬法和火焙法，這兩種方法加工的荔枝干風(fēng)味較淡，果肉顏色較深，烘干過(guò)程干燥不均勻等。
微波干燥起源于 20 世紀 40 年代，微波輔助干燥技術(shù)已經(jīng)廣泛應用于食品工業(yè)和農產(chǎn)品加工等領(lǐng)域[4]。
研究發(fā)現微波干燥與傳統干燥方法相比較提高了干燥速率，減少了干燥時(shí)間，提高了工業(yè)產(chǎn)量和產(chǎn)品的品質(zhì)[5-7]。
目前，微波干燥技術(shù)已被應用到農產(chǎn)品的干燥技術(shù)的研究中[8-12]，在果蔬產(chǎn)品干燥方面，分別對荔枝[13]、龍眼[14-15]等進(jìn)行了微波干燥研究。
2.2 材料與方法
2.2.1 荔枝原料
荔枝為采自廣東省農業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所的新鮮荔枝。
所采摘的荔枝大小、形狀和成熟度盡可能保持均一。
根據荔枝成熟時(shí)間及栽培面積，選取廣東地區21個(gè)品種，其中早熟品種包括：稱(chēng)砣、白蠟、妃子笑、白糖罌、園枝、黑葉、大造、狀元紅8個(gè)品種;
中熟品種包括：丁香、桂味、雞嘴、青皮、田巖、水晶球6個(gè)品種;晚熟品種包括：糯米糍、紅糯、玉荷包、掛綠、懷枝、尚枝、雪懷子7個(gè)品種。
干燥方法試驗采用荔枝品種為黑葉，采自廣東省農業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所的新鮮荔枝。
所采摘的荔枝大小、形狀和成熟度盡可能保持均一。
2.2.2 主要試劑
試劑名稱(chēng) 規格 產(chǎn)地和生產(chǎn)廠(chǎng)家
重蒸酚 分析純 北京鼎國生物技術(shù)有限公司
正丁醇 分析純 廣州化學(xué)試劑廠(chǎng)
氯仿 分析純 廣州化學(xué)試劑廠(chǎng)
牛血清白蛋白 分析純 上海伯奧生物科技有限公司
考馬斯亮藍 G-250 分析純 北京鼎國生物技術(shù)有限公司
沒(méi)食子酸 分析純 上海中藥標準化研究
中心硫酸亞鐵 分析純 西安化學(xué)試劑廠(chǎng)
碳酸鈉 分析純 汕頭市光華化學(xué)廠(chǎng)
葡萄糖 分析純 廣州化學(xué)試劑廠(chǎng)
第三章 荔枝果肉多糖的提取工藝優(yōu)化研究……………38
3.1 引言……………………………38
3.2 材料與方法………………………38
3.3 結果與討論……………………………42
3.4 本章小結…………………………………58
參考文獻………………………………58
第四章 荔枝多糖分級沉降制備、純化及結構表征……………62
4.1 引言…………………………………62
4.2 材料與方法……………………63
4.3 結果與分析…………………69
4.4 本章小結………………………………88
參考文獻……………………………90
第五章 荔枝多糖抗氧化護肝功能研究
5.1 引言
生物體內氧化代謝會(huì )產(chǎn)生游離狀態(tài)，帶有不配對電子的分子、原子或離子，即自由基，包括超氧陰離子自由基(O2-)，羥基自由基(·OH)、過(guò)氧化氫(H202)、單線(xiàn)態(tài)氧(1O2)等活性氧[1]。
其特點(diǎn)是：(1)非�；钴S，具有很強的氧化能力;(2)不穩定，只能瞬時(shí)存在;(3)能持續進(jìn)行連鎖反應。
在正常情況下，人體內的自由基處于動(dòng)態(tài)平衡中，但是一旦該平衡被打破，就會(huì )對機體造成損害，從而引發(fā)一系列相關(guān)疾病[2]。
據報道，由氧自由基引起的疾病，已超過(guò) 100 余種，如：高血壓、糖尿病、老年癡呆癥等[3-4]。
目前，已發(fā)現多種植物和真菌多糖具有體內外的抗氧化作用。
木耳多糖[5]、枸杞多糖[6]、天門(mén)冬多糖[7]、云芝多糖[8-9]、中華獼猴桃多糖[10]等具有體外直接清除活性氧的作用。
螺旋藻多糖[11]、黃精多糖[12]、毛木耳多糖[13]可提高生物體內SOD的活力，對活性氧產(chǎn)生的傷害，有明顯的改善作用。
CC14是經(jīng)典的動(dòng)物急性肝損傷造模的毒劑，CCl4經(jīng)肝細胞微粒體內的P-450 酶系代謝后，產(chǎn)生自由基，使細胞膜、內質(zhì)網(wǎng)膜等發(fā)生氯烷化和脂質(zhì)過(guò)氧化，
損傷膜的結構和功能，細胞內谷丙轉氨酶(ALT)溢出并進(jìn)入血液，使血清中ALT水平提高，一般認為ALT的升高水平與肝細胞的損傷程度相關(guān)[14-16]。
第六章 結論與展望
6.1 結論
本論文對荔枝品種的多糖含量、荔枝干的干燥方式、多糖的提取、分離純化、結構表征及其理化性質(zhì)與抗氧化護肝活性等方面進(jìn)行了較為系統的研究，得到以下結論：
(1)比較 21 個(gè)荔枝品種多糖含量，結果表明不同品種的多糖含量差異較為顯著(zhù)，在所選定的品種中，多糖含量極差達 15.09g/kg，變異系數為 75.77%，其中 76%的品種多糖含量分布在 2.0-6.0g/kg 之間，多糖含量最高的品種為黑葉(1
5.72g/kg)，最低的品種為丁香(0.63g/kg)，本文選定黑葉為提取多糖及多糖結構和生物活性研究材料。
(2)比較曬干、熱風(fēng)干燥、微波干燥、真空干燥和冷凍干燥處理對荔枝多糖含量及抗氧化活性的影響，結果表明 5 種干燥處理所得的荔枝干多糖含量及其對自由基清除能力差異不顯著(zhù);
但對 Vc 和總酚含量影響非常明顯，二者含量明顯減少，僅冷凍干燥處理對酚類(lèi)物質(zhì)的影響較小;蛋白質(zhì)和各種氨基酸含量也有下降，但變化不明顯。
(3)分別建立荔枝多糖的熱水浸提、微波輔助提取和超聲波輔助提取的優(yōu)化工藝條件，結果表明，采用熱水浸提荔枝多糖的適宜條件為 pH 8.0，
提取時(shí)間 3.6 小時(shí)，提取溫度為65℃，液/料比為14:1，此條件下的最高提取率為24.29%，實(shí)際提取率為24.02%,與理論值相比，相對誤差為 1.12%左右;
采用微波提取荔枝多糖的適宜條件為 pH 為 8.2，時(shí)間 14.5min，微波功率 580w，液/料比為 11.4:1，此條件下的最高提取率為 24.33%，實(shí)際提取率為 24.12%, 與理論值相比，
相對誤差為 0.87%左右;采用超聲提取荔枝多糖的適宜條件為 pH 為 8.0，時(shí)間 30min，超聲功率 68.85w，液/料比為 10:1，此條件下的最高提取率為 24.32%，
實(shí)際提取率為 24.52%, 與理論值相比，相對誤差為 0.81%左右。
比較 3 種提取方法，提取率依次為：微波提取>超聲提取>熱水浸提;提取時(shí)間長(cháng)短依次為：熱水浸提>超聲提取>微波提取。
參考文獻(略)
生物論文學(xué)術(shù)【2】
探討新西蘭大白兔球周注射曲安奈德后的病理變化
前 言
二十世紀五十年代初，糖皮質(zhì)激素開(kāi)始應用于眼科，治療嚴重的眼部感染，眼內炎，它通過(guò)減少炎性物質(zhì)的滲出、抑制成纖維細胞的增生和炎性肉芽組織的形成來(lái)達到控制炎癥的目的[1]。
曲安奈德( triamcinolone acetonide, TA )又稱(chēng)曲安縮松, 是一種人工合成的由去炎松的基礎上發(fā)展而來(lái)，含氟的長(cháng)效腎上腺糖皮質(zhì)激素。
上世紀八十年代，為使藥物在眼內局部達到較高濃度且維持長(cháng)時(shí)間的作用，臨床上開(kāi)始采用玻璃體腔內注射曲安奈德(TriamcinoloneAcetonide，TA)注射液，
以治療和控制糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞(obstruction of the central retinal vein，CRV)、前葡萄膜炎(anterior uveinis，AU)、
囊樣 黃 斑 水 腫 ( cystoid macular edema ， CME)、 脈 絡(luò ) 膜 新 生 血 管 ( choroidnoerascularigation,CNV)[2-5]等眼科疾病;
還應用于玻璃體切割術(shù)[6]以及其它眼科手術(shù)后的輔助治療。
隨著(zhù)玻璃體內注射的廣泛應用，越來(lái)越多嚴重的并發(fā)癥隨之出現，如眼內炎[7]、高眼壓[8]、晶體損傷[9]等，限制了其臨床應用，因此國內外許多學(xué)者對于某些病歷開(kāi)始嘗試選擇球周注射 TA[10]。
與玻璃體腔注射相比，球周注射后藥物通過(guò)鞏膜滲透到眼內，雖然在玻璃體腔內不能達到較高濃度，但具有風(fēng)險小、易重復注射等優(yōu)點(diǎn)[11]，更易被患者接受。
基于曲安奈德注射液球周注射的諸多特性，球周注射類(lèi)固醇藥物逐漸被廣泛應用于角膜炎，葡萄膜炎等輕中度的眼前節疾病的臨床治療。
國內外實(shí)驗表明：(1)球周注射皮質(zhì)激素能有效治療玻璃體視網(wǎng)膜病變;(2)球周注射曲安奈德是一個(gè)能有效的治療葡萄膜炎的方法;(3)球周注射曲安奈德能夠治療甲狀腺相關(guān)的眼病，并有持續療效。
曲安奈德注射液注射于球周能有效發(fā)揮作用，取得良好的效果，更避免了玻璃體內注射帶來(lái)的各種并發(fā)癥，很大程度上減少了患者的痛苦。
材料與方法
1 實(shí)驗材料
1.1 研究對象
1.1.1 實(shí)驗動(dòng)物
新西蘭兔24只，雌雄不限，清潔級，6月齡，體重2.5-3kg，均購于新疆醫科大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物中心。
實(shí)驗動(dòng)物使用許可證號：SYXK(新)2010-0002。
1.1.2 動(dòng)物飼料
普通飼料(新疆維吾爾自治區實(shí)驗動(dòng)物中心)：大麥30%，玉米5%，豆餅15%，青干草47%，無(wú)機鹽及維生素添加劑3%，每50千克飼料添加蛋氨酸100克。
1.2 主要試劑
主要試劑有：曲安奈德注射液(昆明積大制藥廠(chǎng))、紅霉素眼膏(山東博士倫福瑞達制藥有限公司) 、
鹽酸左氧氟沙星滴眼液(山東博士倫福瑞達制藥有限公司)、硫酸阿托品注射液(廣東南國藥業(yè)有限公司)、鹽酸氯胺酮注射液(遼寧衛星制藥廠(chǎng)) 、鹽酸丁卡因滴眼液(四川制藥) 。
2 實(shí)驗方法
2.1 實(shí)驗的分組方法
健康新西蘭兔24只，雌雄不限，清潔級，6月齡，體重2.5-3kg，適應性喂養1周，觀(guān)察無(wú)異常后隨機分為2組，實(shí)驗組及對照組各12只。
2.2 動(dòng)物的喂養
實(shí)驗歷時(shí)共12周，整個(gè)實(shí)驗期間均飼養于新疆醫科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗中心兔飼養室，均單籠飼養，飲水不限。
2.3 球周注射
球周注射步驟如下：(1)麻醉：使用 1mg 硫酸阿托品注射液和 2mg 鹽酸氯胺酮注射液行全身麻醉;
(2)消毒用粘膜型碘伏滴入結膜囊內，五分鐘后生理鹽水沖洗，并使用碘伏擦拭眶周眼瞼區域 2-3 遍;
(3)用 1ml 注射器按照組別不同分別抽取曲安奈德注射液 0.5ml 和 PBS 溶液 0.5ml;
(4).注射方法：自顳下眶緣緩慢進(jìn)針，緊貼眶底，沿矢狀面前行達眼球赤道部，回抽無(wú)血緩慢注射藥液，拔出針頭，局部棉簽壓迫。
結果 ................15-20
討論
糖皮質(zhì)激素是眼科臨床上應用比較廣泛的藥物, 上世紀八十年代起，為達到藥物在眼內局部高濃度和長(cháng)時(shí)間的持續作用，臨床上開(kāi)始運用長(cháng)效糖皮質(zhì)激素制劑曲安奈德
(TriamcinoloneAcetonide，TA)注射液進(jìn)行玻璃體腔內注射，用以治療和控制糖尿病視網(wǎng)膜病變、中央靜脈阻塞、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、脈絡(luò )膜新生血管等眼科疾病;還應用于其它眼科疾病的輔助治療如Graves眼病和小兒肉芽腫等。
隨著(zhù)玻璃體內注射的廣泛應用，較多的嚴重的并發(fā)癥隨之出現，例如眼內炎、高眼壓、晶體損傷等，因此國內外開(kāi)始在炎癥較輕的病案中選擇球周注射TA。
球周注射，藥物是通過(guò)鞏膜滲透到眼內，Michael等[12]研究表明球周注射曲安奈德,如果藥物釋放的速度大于結膜下血管和淋巴管的清除速度,藥物即可透過(guò)鞏膜到達玻璃體腔。
總結
1.球周注射曲安奈德注射液誘導新西蘭大白兔球周的肌肉組織萎縮。
2.球周注射曲安奈德注射液影響了新西蘭大白兔球周的哈氏腺的正常代謝呈增生性改變。
3.球周注射曲安奈德注射液對眼內壓無(wú)影響。
參考文獻(略)
生物論文學(xué)術(shù)【3】
各留置物對新西蘭白兔血液生化、細胞因子、凝血功能的影響
前言
有報道鈦夾進(jìn)入膽總管，以鈦夾為核心形成膽總管結石;移動(dòng)至右卵巢引起盆腔疼痛：移入盆腔或右髂窩癥狀類(lèi)似闌尾炎和輸尿管結石;因鈦夾形成的腹腔膿腫等;金屬夾導電，電凝器接觸它時(shí)引起接觸組織的燒傷。
絲線(xiàn)結扎處理雖較安全，但體內和體外打結均較費時(shí)，且對較深處打結難度較大，多數腹腔鏡醫生尚未熟練掌握。
可吸收材料的應用是微創(chuàng )手術(shù)的發(fā)展趨勢。
可吸收聚合夾(外科止血夾)。
是由人工合成可吸收聚脂材料制成，夾子裝在一圓筒形彈匣內，無(wú)毒，無(wú)致熱源，其酯化物在特異酶作用下分解為水和二氧化碳后主要由尿液排出體外。
由于可吸收結扎夾的夾閉端是倒鎖齒型的，可吸收結扎夾兩鉤端必須完全暴露出來(lái)才能夾緊可靠，這就使手術(shù)者要求游離出更長(cháng)的夾閉管腔空間和更高的手術(shù)技巧，才能使手術(shù)順利、安全地完成。
可吸收結扎夾封閉管腔在術(shù)中出血量方面與絲線(xiàn)組無(wú)明顯差異，這與手術(shù)者的技術(shù)熟練程度有關(guān)，在其術(shù)后并發(fā)癥方面也無(wú)差異，這就提示我們在封閉膽囊管或膽。
第一部分華陽(yáng)可吸收結扎夾止血效果及夾閉效果研究
1.1實(shí)驗材料
1.1.1實(shí)驗動(dòng)物
健康成年新西蘭大白兔，雌雄各半，隨機分組，體重1.8-2.2kg，由廣西醫科大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物中心提供(實(shí)驗動(dòng)物使用許可證：SCXK桂2009-0002)。
1.1. 2供試品及陽(yáng)性對照品
供試品：華陽(yáng)可吸收結扎夾，惠州華陽(yáng)醫療器械有限公司(規格：A12,批號：L200909002)。
陽(yáng)性對照品1:醫用1號縫合線(xiàn)，十.醫用縫合線(xiàn)廠(chǎng)牛產(chǎn)(規格：3-0#，批號20090112)。
陽(yáng)忡對照品2:《^科可吸收結扎火，Tyco Healthcare Group L.P (規格：12mm Lapro-Clip ，批號：LOTNOA0167)。
1. 2實(shí)驗方法
1.2. 1實(shí)驗分組
共分為4組，分別為正常對照組、陽(yáng)性對照組1 (絲線(xiàn)組)、陽(yáng)性對照組2 (泰科組)、受試組(華陽(yáng)組)。
1.2. 2藥品的配制
10%水合氯酸溶液：20.0g水合氯醛加入200mL生理鹽水(Normal Saline,NS)中，攪拌均勻，配成10%溶液，現配現用。
新西蘭大白兔使用劑量為3-5mL/ kg。
青霉素、鏈霉素：用相應體積NS溶解，現配現用。
1.2.3手術(shù)方法
4組動(dòng)物術(shù)前耳緣靜脈取血5 mLX2管，除正常對照組外，其余各組新西蘭大白兔稱(chēng)重，術(shù)前肌肉注射青霉素(10萬(wàn)U/ kg)。
用10%水合氯醛(3-5ml/kg)從其耳緣靜脈實(shí)施麻醉，備皮、消毒、打開(kāi)腹腔，充分暴露膽囊，旁幵0.2cm剪開(kāi)漿膜層，逆行剝離膽囊至膽囊管，
分別用絲線(xiàn)或可吸收夾進(jìn)行結扎或夾閉膽囊管及膽囊動(dòng)脈欲切斷處的近端，其膽囊管及膽囊動(dòng)脈切斷處的遠端使用一個(gè)止血鉗夾閉，切斷膽囊管和膽囊動(dòng)脈，取出切除膽囊。
觀(guān)察無(wú)出血及膽漏，術(shù)畢，逐層縫合，消毒，并腹腔注射鏈霉素(25萬(wàn)U/ kg),放回飼養籠，1^由飲食，喂常規混合t'ij料。
術(shù)后二天，切;天肌肉注射青霉素(20萬(wàn)U/只)、鏈露素(50萬(wàn)U/只)及3%過(guò)氧化M溶液、碘伏溶液消毒換藥以防止傷口感染化膿，并大觀(guān)察新兩:>^人|'1兔活動(dòng)狀態(tài)、進(jìn)食量。
第二部分 華陽(yáng)夾對新西蘭白兔肝腎組織病理組織學(xué)的影響 .........20-40
2.1 實(shí)驗材料 ...............20-21
2.2 實(shí)驗方法 ..............21-23
2.3 實(shí)驗結果................ 23-38
2.4 實(shí)驗討論............. 38-40
第三部分 各留置物對新西蘭白兔血液生化、細胞因子、凝血功能的影響
3. 1實(shí)驗材料
3. 1. 1實(shí)驗動(dòng)物
健康成年新西蘭大白兔，雌雄各半，隨機分組，體重1.8-2.2kg，由廣兩I矢科大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物中心提供(實(shí)驗動(dòng)物使用許可證：SCXK桂2009-0002)。
3. 1.2供試品及陽(yáng)性對照品
供試品：華陽(yáng)可吸收結扎夾，惠州華陽(yáng)醫療器械有限公司(規格：A12,批號：L200909002)。
陽(yáng)性對照品1:醫用1號縫合線(xiàn)，上醫川縫合線(xiàn))'牛:產(chǎn)(規格：3-0#,批號20090112)。
陽(yáng)性對照品2: 泰科可吸收結扎火，Tyco Healthcare Group L.P (規格：12mm Lapro-Clip ，批號：LOTNOA0167)。
總結
(1)在術(shù)中出血量的比較結果表明，華陽(yáng)夾在處理較深部位手術(shù)難度明顯優(yōu)于絲線(xiàn)結扎，且手術(shù)時(shí)間及術(shù)后并發(fā)癥方面與同類(lèi)產(chǎn)品泰科夾比較無(wú)明顯統計學(xué)差異，華陽(yáng)夾用于夾閉膽囊管殘端及膽囊動(dòng)脈是安全的。
(2)從肉眼觀(guān)察，華陽(yáng)組在術(shù)后4周水腫消退后，肝色基本與正常組相同：肝色均一紅潤，柔軟、有光澤。
光鏡下觀(guān)察有不同程度水變性，但無(wú)壞死及纖維變性;膽囊管殘端術(shù)后開(kāi)始出現大量纖維組織增生及異物肉芽腫形成。
電鏡下觀(guān)察肝細胞超微結果無(wú)明顯改變。
故可以證明華陽(yáng)夾對新兩蘭白兔肝臟、腎臟在病理組織學(xué)方面無(wú)明顯損害。
(3)在肝腎功能生化指標檢測中表明，華陽(yáng)夾對新兩蘭1'1兔肝'I予功能明顯損齊，故:rt在膽囊摘除術(shù)屮的應用與同類(lèi)產(chǎn)品^^科夾的療效是相同并安全的。
(4)手術(shù)后2， 3， 4周IL-6、 IL-8和TNF-a A !ft均有增勢，似各組'jili常組間比較無(wú)統計學(xué)差^。
表明^陽(yáng)火i"n十部刺激及下術(shù)創(chuàng )傷引起的炎癥反應對機體肝'If功能影響不大，在動(dòng)物肌囊摘除術(shù)屮的應川是安全的，其療效與同類(lèi)產(chǎn)品泰科火相"1。
(5)術(shù)前及術(shù)后2, 3, 4周各組PT、 APTT. FIB. INR、 TT的比較尤統計學(xué)差異，表明華陽(yáng)夾對新兩蘭白兔的凝血功能無(wú)明顯影響。
參考文獻(略)
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