細菌室應注意的一些事項

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　　【摘要】 從檢驗人員培訓、消毒、工作態(tài)度、質(zhì)量控制、檢驗方案設計、使用抗菌藥物、菌種保存及廢棄物管理等幾個(gè)方面總結分析了臨床微生物檢驗注意的一些事項。

　　【關(guān)鍵詞】 臨床微生物; 檢驗; 問(wèn)題; 措施

　　隨著(zhù)醫學(xué)科學(xué)的迅速發(fā)展，超級細菌的出現，細菌工作已引起人們的高度關(guān)注。筆者結合本醫院的實(shí)際情況， 對微生物實(shí)驗室的一些注意事項總結如下。

　　1加強院內感染知識培訓和自我防護培訓內容應為職業(yè)道德教育，醫院感染管理的法律法規，相關(guān)的規章制度和操作規程[1]。醫院內部患者聚集，因而是病原體高度集中的場(chǎng)所，某些醫院感染病原菌在潮濕環(huán)境中存活較久，進(jìn)入易感患者體內，導致醫院感染，故定期對醫院的科室和病房做微生物監測，可以及時(shí)發(fā)現傳染源，并制定預防感染和控制感染的措施。如反饋實(shí)驗室資料：微生物檢驗室應每天對臨床各種標本進(jìn)行耐藥譜匯總，并定期報告醫院感染控制部門(mén)，控制部門(mén)提供信息給臨床，以便臨床醫師了解醫院的主要流行病原菌及耐藥譜，加強合理使用抗生素;定期總計細菌藥敏試驗。醫院內的感染監測與控制工作與微生物檢驗室的水平密切相關(guān)故微生物檢驗工作者的專(zhuān)業(yè)素養應得到訓練與提高。應提高檢驗工作者的理論素養，并豐富感染性疾病診斷、治療方面的相關(guān)知識。應調動(dòng)檢驗工作者的積極主動(dòng)性，在快速準確做好病原菌診斷的基礎上，及時(shí)與臨床進(jìn)行有效溝通。檢驗工作者應把醫院感染監測工作當成自己的責任和使命，指導臨床實(shí)施科學(xué)的消毒和隔離，真正發(fā)揮微生物檢驗工作者在醫院感染控制工作中的重要作用。操作時(shí)戴帽子、口罩, 必要時(shí)穿隔離衣、膠鞋、戴手套, 隨時(shí)注意手的清潔、消毒。其人員應進(jìn)行定期健康體檢及必要的預防接種，增強自身抵抗力。

　　2做好消毒工作室內定時(shí)通風(fēng)、紫外線(xiàn)照射, 物體表面用消毒液擦拭, 嚴格劃分清潔區、半污染區、污染區, 增加設施投入, 房間布局合理, 防止危險因素擴散, 每月進(jìn)行室內微生物學(xué)檢測。紫外線(xiàn)消毒具有比較多的優(yōu)勢，張璐曾在研究中指出其優(yōu)點(diǎn)：(1) 高效率殺菌性能： 紫外線(xiàn)一般在使用1～2 s 后對細菌、病毒的殺菌即可達到99%~99.9%的殺菌率; (2) 高效的廣譜性， 紫外線(xiàn)殺菌具有最高的光譜性非選擇性的， 在進(jìn)行有效照射后， 它對幾乎所有的細菌、病毒等均達到高效率殺滅; (3) 無(wú)二次污染可能，在進(jìn)行紫外線(xiàn)消毒殺菌過(guò)程中， 不添加任何化學(xué)藥劑， 純物理消毒， 因此沒(méi)有對周?chē)�環(huán)境產(chǎn)生二次污染的可能性; (4) 紫外線(xiàn)殺菌設備簡(jiǎn)單， 占用空間小， 運行維護費用低， 因此總投資較少， 成本低[2]。

　　3檢驗人員的態(tài)度問(wèn)題臨床微生物檢驗至今為止仍不能完全脫離手工，許多結果的判斷仍有賴(lài)于工作人員的主觀(guān)判斷。因此,檢驗人員的工作態(tài)度直接影響檢驗結果。臨床微生物檢驗涉及的環(huán)節較多,任何一個(gè)環(huán)節中細小的差錯,就有可能導致檢驗結果改變,甚至可能會(huì )誤導臨床治療。臨床微生物檢驗人員在日常工作中必須嚴格按照操作規范進(jìn)行操作,時(shí)刻將每一位患者的安危系于心,牢記自己的工作職責。

　　4質(zhì)量控制要到位質(zhì)量控制(室內、室間)是實(shí)驗室的支柱，從時(shí)間段來(lái)看，包括分析前、中、后，工作中注意細節，就可以回顧性解決一些實(shí)際問(wèn)題。堅持室內質(zhì)量控制是做好室間質(zhì)量控制的前提, 室內質(zhì)量控制項目應包括標本采集、培養基、試劑、判斷血清、藥敏紙片等。如：采集的標本不合格， 這方面問(wèn)題較多的是痰液和尿液標本， 對于痰液標本， 正確的留取方法是先讓患者用清水漱口3次， 然后囑其用力從氣管深部咳出痰液， 吐入無(wú)菌容器內送檢。 而實(shí)際情況是很多醫院在采用自然咳痰法留取痰液標本時(shí)， 臨床醫生和護士不做必要的指導， 直接讓患者留痰， 這樣得到的痰標本常常造成氣管、 咽喉及口腔常居菌的嚴重污染， 有的可能根本沒(méi)有痰液成分， 這樣結果常導致致病菌和常居菌混淆， 造成誤檢誤報。 對于尿液標本， 應根據檢驗目的選擇不同的采集方法， 如疑為尿道炎或做衣原體培養檢查， 應取前段尿3～4ml; 如懷疑為膀胱炎或腎炎， 多采用中段尿采集法; 為進(jìn)一步確定菌尿是否來(lái)自腎臟， 可用導尿管采集腎盂尿。如做厭氧培養， 需采用膀胱穿刺采集法。 而結核分枝桿菌的集菌檢查要留取24h尿液， 自然沉淀或加40%明礬形成沉淀后取沉淀送檢。標本質(zhì)量的另一問(wèn)題是采集時(shí)間， 常規要求應在疾病的早期、 急性期、 癥狀典型時(shí)和用藥之前采集標本， 對于已用藥的患者應停藥3天后采集標本; 不能停藥的， 應在下次用藥之前采集，而且需將標本接種在含有藥物中和劑的培養基中培養。選擇購買(mǎi)理想的成品培養基，知名大公司的生化反應管及進(jìn)口藥敏紙片;對于較難鑒定的菌種, 必要時(shí)對一些生化反應多做幾次, 以達到正確鑒定的目的;參考資料非常重要,要求做到全新, 要經(jīng)常不斷地更新知識, 接受新信息, 從本質(zhì)上提高解決疑難問(wèn)題的能力。而參加細菌學(xué)室間質(zhì)評活動(dòng), 則是對實(shí)驗室的工作水平作出的綜合判斷, 也是對實(shí)驗室內質(zhì)量控制的檢驗, 對于提高細菌鑒定水平, 獲取有關(guān)微生物學(xué)的新資料、新方法、新信息、發(fā)現和分析細菌檢驗工作中的錯誤原因, 進(jìn)而可以提高細菌檢驗水平和工作質(zhì)量。

　　5檢驗方案的設計在臨床微生物檢驗中， 檢驗方案的設計是非常重要的， 它直接影響到檢出率的高低。 如結核桿菌形態(tài)學(xué)檢查中使用的染色法， 有人對比研究熒光染色法和萋-尼氏抗酸染色法， 結果熒光染色法檢出陽(yáng)性率56.9%，萋-尼氏抗酸染色法檢出陽(yáng)性率39.5%， 兩者差異有顯著(zhù)性(P<0.01)。在培養檢查上， 培養基選擇和標本的前處理對目的菌的檢出很重要。 對尿、 痰等臨床標本進(jìn)行必要的前處理可除去污染的雜菌， 進(jìn)而明顯提高陽(yáng)性檢出率，比如用生理鹽水清洗痰液。 在培養基的使用上， 常規培養使用的培養基種類(lèi)有限， 有些目的菌因成分的抑制而在所用的培養基中不生長(cháng)。 比如， 對腹瀉患者取糞便分離培養時(shí)， 常規所用的是伊紅美蘭瓊脂和SS瓊脂平板。 腸桿菌科細菌能被選擇出來(lái)， 但弧菌科有些細菌 (如副溶血性弧菌) 因其嗜鹽性在這兩種培養基上多不生長(cháng)。 如果對這類(lèi)細菌仍用常規培養基分離培養， 其結果自然是造成漏檢。

　　6合理使用抗菌藥物 細菌室人員在藥敏試驗時(shí), 對病原菌耐藥性變遷起到監控作用, 通過(guò)對病原菌耐藥性的總結和分析, 可獲得病原菌耐藥性變化的資料, 并改變目前病原學(xué)診斷。細菌培養時(shí)間較長(cháng)不能適應臨床的現狀,應盡快提高細菌快速診斷的水平。根據病原菌種類(lèi)及細菌的藥敏試驗結果, 合理選用抗菌藥物, 給臨床提供指導, 避免臨床盲目用藥, 控制耐藥菌株的產(chǎn)生, 減輕患者經(jīng)濟負擔, 防止醫院感染的發(fā)生。

　　7做好菌種保存與管理[3]收集、保存與管理菌種, 是微生物實(shí)驗室檢驗工作中一項重要內容。尤其是計量認證實(shí)施后, 實(shí)驗室的工作都要程序化、規范化, 對菌種的保存和管理也提出了更嚴格的要求, 收集、保存與管理好菌種, 對提高微生物檢驗工作的質(zhì)量至關(guān)重要。對一般細菌的保存, 如大腸桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌等直接接種普通瓊脂斜面, 35℃培養18～24h后, 放入4℃冰箱, 可保存1～2 個(gè)月。 對白色念珠菌的保存: 一般采用沙保羅氏瓊脂斜面, 28℃培養48～72h后, 放入4℃冰箱, 可保存2～3個(gè)月。對烈性細菌的保存: 如霍亂弧菌等, 應該采取及時(shí)送上級單位, 若暫時(shí)未能上送的菌種應有專(zhuān)人保管。保存菌種的安全問(wèn)題, 應專(zhuān)門(mén)制定一個(gè)菌種保管程序性文件, 明確職責，健全菌種檔案, 認真作好登記, 統一編號, 按規定條件保存，以備用。實(shí)驗完畢后, 要及時(shí)銷(xiāo)毀菌株, 并做好記錄,嚴防病原菌外泄、污染。

　　8做好廢棄物管理一次性醫療用品、器具用后消毒、毀形、焚燒, 專(zhuān)人管理無(wú)害化處理, 并進(jìn)行登記。

　　【參考文獻】

　　1葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程.南京: 東南大學(xué)出版社,1991: 399-400.

　　2張璐. 關(guān)于紫外線(xiàn)筷子消毒機消毒效果的評價(jià). 山西醫藥雜志， 2009， 38 (9)： 820.

　　3陳秀英.菌種保存方法的比較.中國衛生檢驗雜志, 2002,12(2):231.

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