血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢驗方法
血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢驗方法
摘要：目的：探討分析血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢驗方法。
方法：對目前較為常用的4種血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢驗方法進(jìn)行對比，4種方法分別為皮內試驗、環(huán)卵沉淀試驗、酶聯(lián)免疫法和間接凝血試驗，對比4種方法檢驗的敏感性和各自的優(yōu)勢和劣勢。
結果：我們的試驗結果顯示4種方法檢測血吸蟲(chóng)病的陽(yáng)性率分別為皮內試驗94.30%、環(huán)卵沉淀試驗96.80%、酶聯(lián)免疫法98.10%、間接血凝試驗92.70%，4種方法的陽(yáng)性率進(jìn)行比較發(fā)現差異不明顯，P>0.05，不具有統計學(xué)意義。
結論：4種方法都具有較高的檢查敏感性，但又各具特點(diǎn)，在實(shí)際應用中應該靈活結合努力發(fā)揮每種方法最大的優(yōu)勢，使其為臨床診斷提供更為可靠和準確的結果。
關(guān)鍵詞：血吸蟲(chóng)病免疫學(xué)檢驗陽(yáng)性率臨床診斷
血吸蟲(chóng)病是一種嚴重的寄生蟲(chóng)病對人體危害極大，血吸蟲(chóng)的傳染源為哺乳類(lèi)動(dòng)物，常見(jiàn)的感染情況為人畜共患。
感染人群一般都是接觸了被污染的疫水、土壤、食物等進(jìn)而患病[1]。
病蟲(chóng)感染宿主后通常會(huì )有一段潛伏期，因而臨床及時(shí)有效的診斷是提高患者治愈率的關(guān)鍵。
感染后患者常會(huì )出現咳嗽、咯血、發(fā)熱、嗜酸性粒細胞增加等癥狀，如果患者靜脈壁受損還可能發(fā)生血栓。
臨床診斷時(shí)醫生除了觀(guān)察患者的具體癥狀，還要結合實(shí)驗室檢測、免疫學(xué)檢測、超聲檢測等結果做出最終判斷[2]。
我們對目前較為流行的4種血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢驗方法(皮內試驗、環(huán)卵沉淀試驗、酶聯(lián)免疫法和間接凝血試驗)進(jìn)行對比分析，現將結果報道如下。
1資料和方法
1.1背景資料。
選取成熟血吸蟲(chóng)的蟲(chóng)卵作為研究對象，由于蟲(chóng)卵內部毛蚴的分泌排泄物抗原性較強，因而可以和血吸蟲(chóng)宿主的血清相作用進(jìn)而形成特異性的沉淀物質(zhì)。
1.2試驗方法。
對目前較為常用的4種血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢驗方法進(jìn)行對比，4種方法分別為皮內試驗、環(huán)卵沉淀試驗、酶聯(lián)免疫法和間接凝血試驗，具體試驗方法如下。
1.2.1皮內試驗。
按照1∶3000的比例制備新鮮成蟲(chóng)勻漿，使用無(wú)菌注射器和皮試針頭對受試者進(jìn)行皮試注射，注射劑量為0.05ml。
注射完畢后等待15分鐘觀(guān)察結果，具體為檢查受試者的注射部位是否出現丘疹，如果出現要測量其最大直徑，最大直徑大于或等于1.0cm的為陽(yáng)性反應。
1.2.2環(huán)卵沉淀試驗。
抽取受試者的血液樣本進(jìn)行離心處理獲得血清，用融化的石蠟在干凈的載玻片上劃2道間距約為20mm的直線(xiàn)，待石蠟干燥后在2道線(xiàn)間滴加2滴受試者的血清。
然后再向血清中加入約100個(gè)干燥的蟲(chóng)卵混勻，覆上蓋玻片并用石蠟密封四周。
將玻片置于溫箱中培育48小時(shí)后在顯微鏡下觀(guān)察結果。
根據蟲(chóng)卵周?chē)霈F的沉淀物的大小進(jìn)行陽(yáng)性判斷。
1.2.3酶聯(lián)免疫法。
首先制備實(shí)驗組，使用日本血吸蟲(chóng)可溶性蟲(chóng)卵粗抗原(1∶3000)包被聚苯乙烯板，在4℃的溫箱內過(guò)夜培育，第二天進(jìn)行沖洗再加入受試者的血清樣本(1∶200，吐溫-PBS稀釋)，按照同樣的方法制備對照組，對照組不加血清樣本。
最后向實(shí)驗組和對照組中加入底物進(jìn)行顯色處理，并使用酶標比色計讀取吸光度值。
1.2.4間接凝血試驗。
先在U型微量血凝板的第一排的第一孔、第二孔、第三孔和第四孔內分別滴加0.9%的氯化鈉溶液，再向第一孔加入血清樣本混勻，對第二、三、四孔依次根據遞減稀釋法進(jìn)行滴加。
在第三孔和第四孔內加入稀釋后的致敏紅細胞懸液，旋轉震搖混勻后在室溫下靜置1小時(shí)后觀(guān)察記錄結果。
根據四個(gè)孔內的陽(yáng)性反應情況判斷是否為血吸蟲(chóng)病患者。
1.3統計學(xué)方法。
使用SPSS19.0對所有數據進(jìn)行處理，統計分析方法使用卡方檢驗和ANOVA，P<0.05，為差異統計學(xué)顯著(zhù)。
2結果
我們的試驗結果顯示4種方法檢測血吸蟲(chóng)病的陽(yáng)性率分別為皮內試驗94.30%、環(huán)卵沉淀試驗96.80%、酶聯(lián)免疫法98.10%、間接血凝試驗92.70%，見(jiàn)表1。
對皮內試驗、環(huán)卵沉淀試驗、酶聯(lián)免疫法和間接凝血試驗的陽(yáng)性率進(jìn)行比較發(fā)現差異不明顯，P>0.05，不具有統計學(xué)意義。
3討論
血吸蟲(chóng)病是一種嚴重的寄生蟲(chóng)類(lèi)疾病，根據世界衛生組織1995年的統計數據顯示，全球受該病威脅的人口達6億多，其中感染人口接近2億。
可以感染人體的血吸蟲(chóng)主要為曼氏血吸蟲(chóng)、埃及血吸蟲(chóng)、日本血吸蟲(chóng)、間插血吸蟲(chóng)、湄公血吸蟲(chóng)和馬來(lái)血吸蟲(chóng)等，我國是該病的高發(fā)區域，發(fā)病人群主要集中在長(cháng)江流域和南方一些地區[2]。
血吸蟲(chóng)的傳染源為哺乳類(lèi)動(dòng)物，常見(jiàn)的感染情況為人畜共患，多種因素都可以影響血吸蟲(chóng)病的流行，如氣溫、水源、土壤、人口流動(dòng)、社會(huì )制度等。
一般而言，感染人群都是接觸了被污染的疫水、土壤、食物等進(jìn)而患病。
感染后患者常會(huì )出現咳嗽、咯血、發(fā)熱、嗜酸性粒細胞增加等癥狀，如果患者靜脈壁受損還可能發(fā)生血栓。
臨床診斷時(shí)醫生除了觀(guān)察患者的具體癥狀，還要結合實(shí)驗室檢測、免疫學(xué)檢測、超聲檢測等結果做出最終判斷[3]。
對血吸蟲(chóng)病的免疫學(xué)檢測通常采用血吸蟲(chóng)尾蚴和蟲(chóng)卵制備抗原，目前較為常見(jiàn)的方法包括皮內試驗、環(huán)卵沉淀試驗、酶聯(lián)免疫法、間接血凝試驗4種方法。
我們對4種方法的陽(yáng)性率進(jìn)行對比，結果發(fā)現差異不明顯，4種方法的陽(yáng)性率均可達90%以上，說(shuō)明都具有較高的敏感性[4]。
臨床通常使用皮內試驗進(jìn)行普通過(guò)篩，對出現陽(yáng)性的可疑人群進(jìn)一步檢查。
這種方法還可以用于檢查低齡人群是否出現新的感染以考核防治的效果。
皮內試驗對肺吸蟲(chóng)有部分的交叉反應。
該法也不適用于藥物療效的考核，因為患者在治愈后的較長(cháng)時(shí)間內仍會(huì )顯示陽(yáng)性反應。
對于治愈患者使用環(huán)卵沉淀反應進(jìn)行檢測會(huì )發(fā)現反應強度逐漸減弱，因而可以考核療效。
環(huán)卵沉淀反應對絲蟲(chóng)病、肺吸蟲(chóng)等患者的血清有較強的交叉反應。
這種方法常被用于流行疫區治療效果的評價(jià)。
酶聯(lián)免疫法的檢測優(yōu)勢在于和一般常見(jiàn)的寄生蟲(chóng)沒(méi)有明顯的交叉反應。
間接血凝試驗也可以反映治愈患者的血清變化情況，但是由陽(yáng)性轉陰的速度比較緩慢，該法對肺吸蟲(chóng)患者的血清也有部分交叉反應[5]。
由此可見(jiàn)4種方法都具有較高的檢查敏感性，但又各具特點(diǎn)，在實(shí)際應用中應該靈活結合努力發(fā)揮每種方法最大的優(yōu)勢，使其為臨床診斷提供更為可靠和準確的結果。
參考文獻
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