正常結膜囊帶菌情況
正常結膜囊帶菌情況
【摘要】 目的：調查不同人群正常結膜囊帶菌情況及其對常用抗生素的敏感情況。
方法：對未使用任何滴眼液和抗生素的200名受調查者，常規眼科檢查排除淚囊、眼表、前節疾病后，進(jìn)行結膜囊細菌培養和藥物敏感試驗。
結果：在全部受調查者中，細菌培養陽(yáng)性率為43.00%，共培養出15個(gè)菌種103個(gè)菌株;葡萄球菌最多，共51株(占49.51%)，其中表皮葡萄球菌47株(45.63%)，金黃色葡萄球菌2株(1.94%);類(lèi)白喉桿菌次之，共40株(38.83%)。
>55歲人群結膜囊帶菌率明顯高于≤55歲人群，農村人群高于城市人群，均差異顯著(zhù)(P<0.05)。
藥物敏感試驗顯示大部分菌株對目前常用抗生素耐藥。
結論：正常結膜囊可以帶有細菌。
內眼手術(shù)前應選用敏感抗生素以預防術(shù)后感染的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】 結膜囊; 細菌培養; 藥物敏感試驗
[Abstract] Objective： To investigate the positive rate of bacterial culture of normal conjunctival sac and the sensitivity to commonly used antibiotics among different kinds of people.
Methods: Samples were collected and separated from conjunctival sac of 200 normal eyes of 200 subjects and they accepted no eye drops or antibiotic treatment. Regular eye examinations were performed to exclude the lacrimal sac inflammation, ocular surface diseases and anterior segment eyes diseases.
The samples were cultured and their sensibilities to antibiotics were tested. Results: Bacterial positive rate was 43.00% in 200 eyes.There were 103 strains of bacteria belonging to 15 species.
The most prominent bacterium was staphylococcus(51 strains, 49.51%), in which there were 47 strains of staphylococcus epidermis(45.63%) and 2 strains of staphylococcus aureas(1.94%). The next was corgebacterium(40 strains, 38.83%).
The elder person(more than 55 years old ) showed a significant higher bacterial positive rate(P<0.05). And the people from city had a significant lower bacterial positive rate than those from contryside(P<0.05).
Most of the bacteria were not sensitive to commonly used antibiotic drugs. Conclusion: Bacteria may be exist in normal conjunctival sac. Using susceptible antibiotic drugs before eye surgery is suggested to take precautions against the infection.
[Key words] conjunctival sac; bacterial culture; drug sensitivity test
正常人結膜囊可分離出正常菌群或條件致病菌，在外傷、手術(shù)等條件下，結膜囊的細菌可能導致眼內炎的發(fā)生。
感染性眼內炎一旦發(fā)生，可以引起眼球的嚴重破壞和視功能喪失，甚至需要摘除眼球。
因此了解人群中結膜囊內菌種的分布與變化，對眼科內眼手術(shù)前合理選擇抗生素以預防術(shù)后細菌感染性眼內炎的發(fā)生有著(zhù)重要的指導意義。
本研究對正常人結膜囊進(jìn)行細菌培養及藥物敏感試驗，并對結果進(jìn)行分析，以期發(fā)現正常人結膜囊細菌分布和藥物敏感情況，為臨床用藥提供依據，現將結果報告如下。
1 對象與方法
1.1 對象
隨機選擇2009年10月至12月間中大醫院眼科門(mén)診、住院的患者或家屬、部分工作人員共200例200只眼，均自愿接受調查。
其中男性87例，女性113例;右眼94例，左眼106例;年齡9～90(平均56.51)歲，≤55歲者76例，>55歲者124例。
受試者采樣前1個(gè)月內未使用任何滴眼液和抗生素，常規眼科裂隙燈檢查排除眼瞼、眼表、眼前節病變，淚道沖洗排除淚囊炎癥。
1.2 采集方法
取材均由專(zhuān)職眼科醫生進(jìn)行，取材地點(diǎn)常規定期行紫外線(xiàn)消毒。
取材時(shí)囑受試者向上方注視，用左手大拇指和食指分開(kāi)眼瞼，充分暴露下方結膜囊，右手用無(wú)菌棉拭子放入結膜囊內，輕輕扭轉擦拭取材，自一側到另一側;取材時(shí)注意不遺漏內眥部，且棉拭子不觸及睫毛或瞼緣等以避免污染。
1.3 細菌鑒定與藥敏試驗
將已采集標本的棉拭子涂布劃線(xiàn)于哥倫比亞血瓊脂平板上，然后將標本置于37 ℃恒溫CO2細菌培養箱中培養，48 h后觀(guān)察細菌生長(cháng)情況，無(wú)細菌生長(cháng)者為陰性，有細菌生長(cháng)者為陽(yáng)性。
細菌菌種鑒定通過(guò)美國德林公司MicroScan微生物自動(dòng)鑒定/藥敏分析系統Walkaway?40或法國生物梅里埃公司VITEK2細菌自動(dòng)鑒定分析儀進(jìn)行，同時(shí)檢測各種抗生素的最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration，MIC)。
藥物敏感試驗根據美國國家臨床實(shí)驗標準委員會(huì )(national committee for clinical laboratory standards，NCCLS)標準進(jìn)行。
1.4 統計學(xué)處理
采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行統計學(xué)處理，計數資料行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學(xué)意義。
2 結 果
2.1 結膜囊細菌培養情況
送檢200份標本中，陽(yáng)性86例，陰性114例，陽(yáng)性率為43.00%。
單眼同時(shí)檢出2種細菌者17例。
共培養出陽(yáng)性細菌103株，分屬15個(gè)菌屬。
陽(yáng)性菌株主要是革蘭陽(yáng)性細菌，占92.23%，其中表皮葡萄球菌最多，共47株(占45.63%);類(lèi)白喉桿菌次之，共40株(占38.83%)。
革蘭陰性菌少見(jiàn)，占7.77%。
正常結膜囊檢出細菌的分布見(jiàn)表1。
表1 正常結膜囊檢出細菌菌株的分布情況
2.2 結膜囊細菌培養結果與性別的關(guān)系
200例調查者中男性87例，其中35例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為40.23%;女性113例，其中51例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為45.13%。
經(jīng) χ2檢驗， χ2=0.482,P=0.487，差異無(wú)統計學(xué)意義。
2.3 結膜囊細菌培養結果與年齡的關(guān)系
200例調查者中≤55歲者76例，其中26例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為34.21%;>55歲者為124例，其中60例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為48.39%。
經(jīng) χ2檢驗， χ2=3.864,P=0.049,差異有統計學(xué)意義。
2.4 結膜囊細菌培養結果與眼別的關(guān)系
200例調查者中右眼94例，其中38例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為40.43%;左眼106例，其中48例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為45.28%。
經(jīng) χ2檢驗， χ2=0.480,P=0.489，差異無(wú)統計學(xué)意義。
2.5 結膜囊細菌培養結果與居住地的關(guān)系
200例調查者中居住農村者為82例，其中58例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為70.73%;居住市區者118例，其中28例為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為23.73%。
經(jīng)χ2檢驗， χ2=43.609,P=0.000,差異有統計學(xué)意義。
2.6 結膜囊細菌藥敏試驗
大多數革蘭陽(yáng)性菌對臨床常用的青霉素、紅霉素、頭孢唑啉及氯潔霉素耐藥，對萬(wàn)古霉素、利福平、達福普汀及呋喃妥因等敏感。
革蘭陰性菌檢出率低，對大部分抗生素如氨芐青霉素、頭孢第3代、左氧氟沙星等較為敏感。
3 討 論
細菌在自然界中廣泛存在，結膜囊是一個(gè)與外界相通的腔隙，長(cháng)期暴露于自然界中，出生不久就可以有細菌共生，并隨生活環(huán)境、年齡的變化而不斷變化。
正常人眼瞼、瞼緣處常有表皮葡萄球菌、類(lèi)白喉桿菌、微球菌等寄生。
正常人結膜囊可無(wú)細菌(約30%)或暫時(shí)存在少數表皮葡萄球菌、甲型鏈球菌、類(lèi)白喉桿菌、丙酸桿菌，偶見(jiàn)卡他球菌、金黃色葡萄球菌、腸道細菌等。
長(cháng)期使用廣譜抗生素、激素等情況下，正常菌群比例關(guān)系發(fā)生改變，或耐藥菌株轉為優(yōu)勢，表現為菌群失調。
眼科診療中耐藥菌株感染、條件致病菌感染，特別是革蘭陰性桿菌感染已日益突出[1]。
文獻報道正常結膜囊的細菌帶菌率為20.6%～98.8%[2-3]不等，最常見(jiàn)的細菌有表皮葡萄球菌和棒狀桿菌(占25%以上)，痤瘡丙酸桿菌及金黃色葡萄球菌占5%～15%不等[4]。
曾樹(shù)森等于2007年報道397例正常人結膜囊細菌培養陽(yáng)性率為21.2%，前3位為表皮葡萄球菌(51.2%)、金黃色葡萄球菌(11.9%)、棒狀桿菌屬(7.1%)[5]。
孫士營(yíng)等[6]于2005年對1 733例眼部無(wú)感染的白內障者術(shù)前進(jìn)行結膜囊細菌培養，陽(yáng)性率為51.6%，主要為革蘭陽(yáng)性球菌(81.4%)和革蘭陰性桿菌(12.9%)，其中表皮葡萄球菌最多。
本組人群中共培養出陽(yáng)性細菌103株，15個(gè)菌屬，細菌培養陽(yáng)性率為43.00%，位于前3位的分別是表皮葡萄球菌(45.63%)、類(lèi)白喉桿菌(38.83%)和金黃色葡萄球菌(1.94%)，這與大部分文獻報道相符。
此外我們還檢出了不很常見(jiàn)的草綠色鏈球菌、腐生葡萄球菌、肺炎鏈球菌、糞腸球菌等革蘭陽(yáng)性球菌，以及大腸埃希菌、陰溝腸桿菌、奇異變形桿菌、洛菲不動(dòng)桿菌、產(chǎn)堿桿菌屬、耐放線(xiàn)不動(dòng)桿菌、克氏檸檬酸桿菌等革蘭陰性菌。
本次調查中，≤55歲者結膜囊帶菌率為34.21%，>55歲者帶菌率為48.39%，后者高于前者，且差異有統計學(xué)意義(P<0.05)，這種差異可能與老年人抵抗力下降、淚膜穩定性差以及淚液中抗體、補體、乳鐵蛋白等降低有關(guān)。
農村人群結膜囊帶菌率為70.73%，明顯高于城市人群(23.73%)(P<0.05)，分析可能與兩組人群的居住環(huán)境、衛生習慣和衛生狀況不同有關(guān)。
通常認為正常人眼部的這些菌屬為條件致病菌，無(wú)致病性或偶有致病性，現在已有條件致病菌成為化膿性眼內炎首要致病菌的報道[7]。
由于眼淚的清洗作用和溶菌酶的溶菌作用，正常結膜囊內的細菌數量通常很少，當結膜與角膜上皮完整時(shí)，起到一個(gè)屏障作用，一般不會(huì )出現感染。
而術(shù)后，由于創(chuàng )傷，某些條件致病菌可引起傷口感染，導致眼內炎的發(fā)生，且一旦發(fā)生，可嚴重損害患者的視力。
有文獻報道在細菌性眼內炎、細菌性角膜潰瘍、瞼緣炎、結膜炎等眼部感染性疾病中，表皮葡萄球菌占多數[1，8]，這與我們檢測出正常結膜囊中表皮葡萄球菌占多數是一致的，可見(jiàn)條件致病菌與致病菌之間并沒(méi)有本質(zhì)上的區別。
而隨著(zhù)眼內人工晶體植入、閥門(mén)管植入、玻璃體切割等手術(shù)的廣泛開(kāi)展，表皮葡萄球菌的致病性也日益受到重視，現已成為白內障人工晶體植入后慢性眼內炎、眼外傷、內眼手術(shù)后眼內感染的常見(jiàn)致病菌[9-10]。
故對于術(shù)前結膜囊分離出表皮葡萄球菌者應予重視，尤其是老年人，由于抵抗力低下，由表皮葡萄球菌引起手術(shù)后感染的可能性較大，而且易產(chǎn)生耐藥菌株，治療上較為棘手。
綠膿桿菌這種在眼部感染中致病力較強的病菌隨著(zhù)角膜屈光手術(shù)的廣泛開(kāi)展感染發(fā)生率有所增加[11]，但我們這次調查中未檢測到該菌，分析可能與綠膿桿菌在正常人眼中存在率極低，而本研究的調查例數相對較少有關(guān)。
目前眼部及全身使用的抗生素種類(lèi)繁多，我們選用臨床常用的抗生素分別對檢出的革蘭陽(yáng)性和陰性細菌進(jìn)行藥物敏感試驗，結果表明，培養出的陽(yáng)性菌大多數對臨床常用的青霉素、頭孢唑啉、紅霉素、氯潔霉素耐藥，對萬(wàn)古霉素、呋喃妥因、利福平等敏感，檢出率最多的表皮葡萄球菌對臨床常用的青霉素、紅霉素、氯潔霉素和氧氟沙星產(chǎn)生耐藥菌株。
正常結膜囊細菌對臨床常用抗菌藥物耐藥性高，但對不常用抗生素耐藥性低，表明細菌耐藥性的發(fā)生與臨床用藥密切相關(guān)，大量廣泛使用抗生素將導致結膜囊內正常的細菌對這些抗生素的耐藥性增加[12]。
所以，在使用抗生素滴眼液時(shí)，要嚴格掌適應證，避免濫用抗生素。
總之，我們關(guān)于正常結膜囊細菌帶菌及藥物敏感情況的調查提示，內眼手術(shù)前應選用敏感抗生素以預防術(shù)后感染的發(fā)生。
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