2017年衛生資格檢驗技師精華考點(diǎn)
2017年衛生資格考試即將來(lái)臨，相信大家都有相信通過(guò)考試的。接下來(lái)應屆畢業(yè)生小編為大家搜索整理了2017年衛生資格檢驗技師精華考點(diǎn)，預祝大家考試順利。
尿液化學(xué)成分檢查項目之一
尿液蛋白為尿液化學(xué)成分檢查中最重要的項目之一。正常人的腎小球濾液中存在小分子量的蛋質(zhì)，在雙月刊牢牢曲小管時(shí)絕大部分又被重吸收，因此終尿中的蛋白質(zhì)含量很少，僅為30-130mg/24h.隨機一次尿中蛋白質(zhì)為0.80mg/L.尿蛋折定性試驗呈陰性反應。
當尿液中蛋白質(zhì)超過(guò)正常范圍時(shí)稱(chēng)為蛋白尿，含量大于0.1g/L時(shí)定試驗可陽(yáng)性。正常時(shí)分子量在7萬(wàn)以上的蛋白質(zhì)不能通過(guò)腎小球濾過(guò)膜，而分子量1-3萬(wàn)的低分子蛋白質(zhì)雖大多可通過(guò)濾過(guò)膜，但又為近曲小管重吸收，由于腎小管細胞分泌的蛋白如TammHorsfall蛋白(T-H蛋白)、SigA等以及下尿路分泌的粘液蛋白可進(jìn)入尿中。
尿蛋白質(zhì) 2/3來(lái)自血漿蛋白，其中白蛋白約占40%其余為小分子量的酶(溶菌酶等、)肽類(lèi)、激素類(lèi)先進(jìn)，如將正常人尿液濃縮后再經(jīng)免疫電泳，可按蛋白質(zhì)的分子量量大小分成以下3組：
�、俑叻肿恿康鞍踪|(zhì)：分子量大于9萬(wàn)，含量極微，包括由腎髓袢升支極及遠曲小管上皮細胞分泌的T-H糖蛋白及分泌型IGA等;
�、谥蟹肿恿康鞍踪|(zhì)：分子量4-9萬(wàn)，是以白蛋白為主的血漿蛋白，可占尿蛋月總數的1/2-2/3;③低分子量蛋白質(zhì)：分子量小于4萬(wàn)，絕大多數已在腎小管重吸收。因此尿中含量極少，如免疫球蛋白FC片段，游離輕鏈、α1微球蛋白、β2微球蛋白等。
熒光色素
許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱(chēng)為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有：
1.異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate，FITC)為黃色或橙黃色結晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑。分子量為 389.4，最大吸收光波長(cháng)為490——495nm，最大發(fā)射光波長(cháng)520——530nm，呈現明亮的黃綠色熒光，結構式如下：有兩種同分異結構，其中異構體Ⅰ型在效率、穩定性、與蛋白質(zhì)結合能力等方面都更好，在冷暗干燥處可保存多年，是應用最廣泛的熒光素。其主要優(yōu)點(diǎn)是：①人眼對黃綠色較為敏感，②通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。
2.四乙基羅丹明(rhodamine，RIB200)為橘紅色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性質(zhì)穩定，可長(cháng)期保存。結構式如下：最大吸收光波長(cháng)為570nm，最大發(fā)射光波長(cháng)為595～600nm，呈橘紅色熒光。
3.四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC)結構式如下：最大吸引光波長(cháng)為 550nm，最大發(fā)射光波長(cháng)為620nm，呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明，可配合用于雙重標記或對比染色。其異硫氰基可與蛋白質(zhì)結合，但熒光效率較低。
免疫熒光原理
免疫學(xué)的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發(fā)生反應時(shí)，只要知道其中的一個(gè)因素，就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上，與其相應的抗原(或抗體)結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
直接法：將標記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。
間接法：如檢查未知抗原，先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進(jìn)行反應，用水洗去未反應的抗體，再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應，使之形成抗原—抗體—抗體復合物，再用水洗去未反應的標記抗體，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體，則表明抗原標本是已知的，待檢血清為第一抗體，其它步驟的抗原檢查相同。
標記的抗抗體是抗球蛋白抗體，同于血清球蛋白有種的特異性，如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發(fā)生反應，因此，制備標記抗體適用于雞任何抗原的診斷。
免疫熒光技術(shù)特點(diǎn)
該技術(shù)的主要特點(diǎn)是：特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是：非特異性染色問(wèn)題尚未完全解決，結果判定的客觀(guān)性不足，技術(shù)程序也還比較復雜。
熒光免疫法按反應體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比，熒光免疫法無(wú)放射性污染，并且大多操作簡(jiǎn)便，便于推廣。國外生產(chǎn)的TDM用試劑盒，有相當一部分即屬于此類(lèi)，并且還有專(zhuān)供TDM熒光偏振免疫分析用的自動(dòng)分析儀生產(chǎn)。
由于一般熒光測定中的本底較高等問(wèn)題，熒光免疫技術(shù)用于定量測定有一定困難。新發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測定，與酶免疫測定和放射免疫分析一樣，在臨床檢驗中應用。
抗原抗體反應
將抗原(標準品和受檢標本)、標記抗原和抗血清按順序定量加入小試管中，在一定的溫度下進(jìn)行反應一定時(shí)間，使競爭抑制反應達到平衡。不同質(zhì)量的抗體和不同含量的抗原對溫育的溫度和時(shí)間有不同的要求。
如受檢標本抗原含量較高，抗血清的親和常數較大，可選擇較高的溫度(15～37℃)進(jìn)行較短時(shí)間的溫育，反之應在低溫(4℃)作較長(cháng)時(shí)間的溫育，形成的抗原抗體復合物較為牢固。
抗血清的檢定
含有特異性抗體的抗血清是放射免疫分析的主要試劑，常以抗原免疫小動(dòng)物誘發(fā)產(chǎn)生多克隆抗體而得�？寡宓馁|(zhì)量直接影響分析的靈敏度和特異性�？寡遒|(zhì)量的指標主要有親和常數、交叉反應率和滴度。
1.親和常數親和常數(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗體與相應抗原的結合能力。K值的單位為mol/L，即表示 1mol抗體稀釋至若干L溶液中時(shí)，與相應的抗原結合率達到50%.抗血清K值越大，放射免疫分析的靈敏度、精密和準確度越佳�？寡宓腒值達到 109～1012mol/L才適合用于放射免疫分析。
2.交叉反應率放射免疫分析測定的物質(zhì)有些具有極為類(lèi)似的結構，例如甲狀腺素的T3、T4，雌激素中的雌二醇、雌三醇等。針對一種抗原的抗血清往往對于其類(lèi)似物會(huì )發(fā)生交叉反應。
因此交叉反應率反映抗血清的特異性，交叉反應率過(guò)大將影響分析方法的準確性。交叉反應率的測定方法為用與抗血清相應抗原及其類(lèi)似物用同法進(jìn)行測定，觀(guān)察置換零標準管50%時(shí)的量。以T3抗血清為例，置換零標準50%T3為1ng，其類(lèi)似物T4則需 200ng，則其交叉反應率為：1/200=0.5%.
3.滴度滴度系指將血清稀釋時(shí)能與抗原發(fā)生反應的最高稀釋度。它反映抗血清中有效抗體的濃度。在放射免疫分析中滴度為在無(wú)受檢抗原存在時(shí)，結合50%標記抗原時(shí)抗血清的稀釋度。
胃粘液|碳酸氫鹽
1.粘液(mucus)胃粘膜以常處于與胃液接觸中，而只有食物被消化，胃組織不受損傷，其部分原因是因為覆蓋于全胃表面的一層膠狀粘液的保護作用。這種膠狀物形成一種粘液屏障與胃粘膜屏障不同，保護胃沾膜免受酸、胃蛋白酶及其它的害物質(zhì)侵蝕。這還人滑潤作用，使胃粘膜不受機械性損傷。粘液不能阻擋水和電解質(zhì)的通透。在基礎狀況下對胃酸有一定的中和作用，但在刺激后胃酸分泌時(shí)，此時(shí)作用微不足道。
2.碳酸氫鹽：是覆蓋于胃表面的粘液一碳酸氫鹽屏障，對粘膜起保護作用，這個(gè)屏障作為含有PH梯度的膠狀物為上皮表面提供了一處中性微環(huán)境。碳酸氫鹽由胃表面粘液細胞所分泌。
胃液中鹽酸
胃液中鹽酸以解離的游離酸與結合的結合酸兩種形式在，兩者加在一起為交響曲鹽酯。此外胃液中還有極少的可以忽略不計的其它酸性物質(zhì)，如有機酸乳酸、乙酸等及酸性鹽酸性磷酸鹽。這些酸總和起來(lái)以總酸度表示，但目前多以總鹽酸分泌量表示胃液酸排出量。
鹽酸的主要消化功能是胃蛋白酶原的激活提供所必須的高度酸化條件，同時(shí)也能有限地水解少許多肽和多糖。胃酸還殺死食入細菌的能力，此錢(qián)鹽酸進(jìn)入小腸后可以促進(jìn)胰液、腸液和膽汁的的分泌促進(jìn)對鈣和鐵等物質(zhì)的吸收。胃液過(guò)多或過(guò)少均可出現許多癥狀，或成為疾病的原因之一。測定胃鹽酸分泌量是常用的測量胃分泌功能的試驗。
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