小議應用微柱凝膠法鑒定新生兒血型
【摘要】 目的探討卡式微柱凝膠血型鑒定法在鑒定新生兒血型中的應用。方法選取100份新生兒外周血標本，采用鹽水試管法和卡式微柱凝膠法同時(shí)進(jìn)行ABO和Rh(D)血型鑒定。結果試管法正定型符合率98%，微柱凝膠法正定型符合率100%。結論微柱凝膠法檢測新生兒的ABO和Rh(D)血型時(shí)優(yōu)于傳統試管法。
【關(guān)鍵詞】 微柱凝膠法;新生兒;血型
由于新生兒的ABO血型抗原較成年人弱，約只有成人的1/4，且含有來(lái)自母體的抗體，免疫反應相對較弱[1]，故血型血清學(xué)的檢測難度較大，所以新生兒血型只能由檢測紅細胞抗原正定型來(lái)鑒定其ABO血型。長(cháng)期以來(lái)人們一直沿用的手工法操作不易標準化，且干擾因素較多，血型錯檢時(shí)有發(fā)生，1986年Lapierre發(fā)明了微柱凝膠技術(shù)并用于鑒定血型，該方法具有易于自動(dòng)化、標準化、反應結果可靠和特異性強等特點(diǎn)，在許多醫院和血站被應用[2] 。該系統的基本原理是通過(guò)微小的凝膠顆粒構成的濾網(wǎng)在系統內控制離心的條件下，將凝集的紅細胞和游離的紅細胞分離開(kāi)來(lái)，從而形成不同的反應圖譜，再通過(guò)系統的自動(dòng)判讀裝置判斷血型[3]。自2010年開(kāi)始本院檢驗科采用該技術(shù)鑒定新生兒血型，在結果的準確性和操作的方便性上都有了很大程度的提高。
1材料與方法
1.1標本來(lái)源
100例標本來(lái)自2010年1月—2011年8月本院新生兒病房，每名新生兒抽EDTA抗凝血2ml。
1.2試劑與儀器
微柱凝膠血型卡(DianaGel Confirm)、離心機由北京斑珀斯技術(shù)技貿有限公司提供�？笰、抗B血型定型試劑由長(cháng)春生物制品研究所提供，Rh抗D血型定型試劑由上海血液生物制品研究所提供。
1.3檢測方法
鹽水試管法參照《全國臨床檢驗操作規程》[4]，取受檢者5%紅細胞懸液20μl，抗-A、抗-B、抗-D血清各100μl，混勻，3200r/min離心15s，顯微鏡觀(guān)察結果，鏡下凝集者應判為陽(yáng)性。
1.4微柱凝膠法
將病人EDTA抗凝血充分離心3000轉/5min，取紅細胞50μl加生理鹽水1ml制成5%的紅細胞懸液。撕開(kāi)卡上的錫紙膜，在A(yíng)-B-D-ctl四個(gè)孔內分別懸空加入病人5%紅細胞懸液10μl，將卡放在專(zhuān)用離心機中離心9min，離心結束后在白色背景下觀(guān)察結果。
2結果
微柱凝膠法正定型結果凝集強度全部達到3+以上，錯檢率為0;鹽水試管法凝集強度達到3+以上為95%，結果為散在凝集需借助顯微鏡確定為3%，有2例錯檢，后經(jīng)證實(shí)與微柱凝膠法結果一致。
3討論
卡式微柱凝膠法是1986年Lapierre發(fā)明的一項免疫學(xué)檢測新技術(shù)，是微柱凝膠技術(shù)與以往血型鑒定技術(shù)相結合的產(chǎn)物，其敏感度高，可用于臨床困難血型的鑒定，經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和大量的臨床應用，在許多發(fā)達國家此技術(shù)已作為常規的紅細胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)應用于臨床。新生兒的ABO血型抗原較成人弱，約只有成人的1/4 ，其ABO抗原弱的原因并非缺少糖苷轉移酶，而是由于紅細胞上酶的底物少。新生兒可以從母親獲得IgG ABO抗體，但IgM ABO抗體卻在出生3～6個(gè)月后才合成[5]。微柱凝膠正定型具有檢測敏感性高、特異性強、結果準確、易于觀(guān)察、影響因素少的特點(diǎn)，特別是對抗原較弱的新生兒紅細胞抗原檢測更表現出其優(yōu)越性。試驗中出現的3例抗原性弱的、需借助顯微鏡確定的標本，就都是由于A(yíng)或B抗原極弱，用傳統的試管法鑒定血型時(shí)，傳統試管法的鏡下凝集需借助顯微鏡觀(guān)察，操作繁雜且有一定的困難。微柱凝膠法能用肉眼直接觀(guān)察到極弱的陽(yáng)性反應(±)，能使肉眼不易察覺(jué)的凝集(鏡下1～3個(gè)紅細胞的凝集)明顯化。本次實(shí)驗結果表明，對于血型抗原減弱的新生兒，應用微柱凝膠法能夠成功準確地檢測出其ABO血型，較之傳統的試管法準確、簡(jiǎn)便、快捷、安全，也減少了實(shí)驗人員接觸血液的機會(huì )，易于批量使用，尤其適合兒科和新生兒科標本的檢測。
【參考文獻】
1羅春麗，劉體全. 臨床檢驗基礎，第2版. 北京:人民衛生出版社，1997：97.
2Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al.The gel test:a newway to detect red cell antigen antibody reactions.Transfusion，1990，30:109-113.
3Tills D，Bushrod J，Ward DJ，et al.Typing of normal and variant red cells with ABO，RH，and Kell typing reagents using a gel typing system.Immunohematology，1991，7:94.
4葉應嫵，王毓三，申子瑜. 全國臨床檢驗操作規程，第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：246.
5Mollison PL.Blood transfusion in clinical medicone.London:Blackwell Scientific Publication，1979：243.
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