簡(jiǎn)析丹皮酚對佐劑性關(guān)節炎大鼠IL - 1β、TNF - α 的影響論文
RA中，在抗原的刺激下，T淋巴細胞增多，并且使關(guān)節內的滑膜吞噬細胞產(chǎn)生活性，一系列的免疫反應使細胞因子明顯增多，RA受累關(guān)節炎細胞浸潤而發(fā)生炎癥改變。TNF-α產(chǎn)生的炎癥反應損傷受累的軟骨和骨，最終形成RA病變的關(guān)節畸形。牡丹皮中含有的丹皮酚及其糖苷類(lèi)物質(zhì)均有消炎的作用，對中樞神經(jīng)系統有控制作用，對心血管系統有防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用，還可以利尿、防止組織潰瘍效用。先前的研究表明，丹皮酚對動(dòng)物實(shí)驗性關(guān)節炎具有抑制作用，可以緩解因類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎所導致的肺損傷。本實(shí)驗以先前的已知理論為基礎，進(jìn)一步對丹皮酚治療RA中IL-1β、TNF-α水平的影響，闡明丹皮酚治療RA的作用機制。
1材料和方法
1.1制備
大鼠AA模型在大鼠足跖注射弗氏完全佐劑(Sigma公司產(chǎn)品)，每只注射0.1mL，共15d。期間觀(guān)察大鼠后足的活動(dòng)，及未注射組的前肢活動(dòng)、體重等指標。
1.2實(shí)驗動(dòng)物分組及給藥劑量
選擇實(shí)驗大鼠共32只，不限雌雄。分4組，A組為空白對照組。B組為模型對照組，注射生理鹽水。C組為丹皮酚大劑量治療組，注射丹皮酚量為32mg/kg·d。D組為丹皮酚小劑量治療組，注射丹皮酚量為8mg/kg·d。B、C、D組分別在大鼠后肢足跖關(guān)節內注射弗氏完全佐劑0.1mL/只，共15d，在造模第7天起，每日注射低劑量(8mg/kg)、高劑量丹皮酚(32mg/kg)共21d。
1.3指標測定
1.3.1實(shí)驗大鼠后肢足跖腫脹程度、關(guān)節炎指數21d后，測量后足跖容積，并統計腫脹程度。標注每組實(shí)驗大鼠各個(gè)關(guān)節的RA病變程度，關(guān)節炎指數按5級評分法來(lái)評價(jià)。
1.3.2測定大鼠IL-1β、TNF-α每只取4～5mL血于試管中，靜置30min后，用冷凍離心機以2500r/min的速率離心15min，然后移取上清液0.3mL到凍存試管中，-20℃保存待用，應用ELISA方法測血清中IL-1β和TNF-α的水平。實(shí)驗均按照試劑盒說(shuō)明書(shū)仔細操作。
2結果
2.1丹皮酚對實(shí)驗大鼠RA指數影響
各組經(jīng)過(guò)不同藥物處理后，模型組AI指數高于NC組(P<0.05)。給藥后，Pae低、高劑量組AI顯著(zhù)低于Model組(P<0.05)。
2.2丹皮酚對大鼠IL-1β、TNF-α的影響
關(guān)節炎模型組IL-1β、TNF-α明顯高于NC組(P<0.05)。給藥后，Pae高劑量組IL-1β、TNF-α顯著(zhù)低于Model組(P<0.05)，
3討論
RA是一種進(jìn)行性、多個(gè)關(guān)節受累為體現的免疫系統疾病。RA的病理表現主要是炎癥刺激導致關(guān)節內滑膜的增生、單核細胞浸入，以及在病理情況下新生血管的形成。至今，尚沒(méi)有根治RA的有效方法，更沒(méi)有有效的預防�，F今對于RA患者，主要通過(guò)非甾體抗炎藥、激素和抗風(fēng)濕藥等治療。前期工作證實(shí)了，中藥牡丹皮中含有的丹皮酚具有抑制實(shí)驗性、佐劑性關(guān)節炎大鼠足腫脹的作用，我們在這個(gè)研究基礎上，用丹皮酚調節AA大鼠中細胞因子IL-1β和TNF-α進(jìn)行深入研究。在RA病患中，刺激機體免疫系統機制，并導致體內炎細胞活躍已得到公認，RA和血清中IL-1β和TNF-α的水平顯著(zhù)升高相關(guān)。單核細胞以及吞噬細胞分泌的IL-1β是炎癥開(kāi)始以及推動(dòng)的因素，過(guò)多分泌的IL-1β可以刺激滑液、軟骨釋放PGE2和膠原酶，促動(dòng)滑膜炎癥反應的發(fā)生、骨基質(zhì)的崩解;另外，IL-1β還可以使嗜中性粒細胞、巨噬細胞、淋巴細胞聚集，從而加重炎癥反應。試驗顯示，高劑量丹皮酚組與各組比較顯示:高劑量丹皮酚可以顯著(zhù)抑制佐劑性關(guān)節炎大鼠血清IL-1β因子的水平，所以丹皮酚可以明顯降低血清中IL-1β的水平，可以延緩RA的發(fā)生、發(fā)展。單核巨噬細胞產(chǎn)生的TNF-α可參與疾病活動(dòng)期或進(jìn)展期，在此期間TNF-α高水平表達分泌，如果TNF-α增多，提示疾病處于活動(dòng)期，疾病的嚴重程度增高。TNF-α與IL-1β很相似，其作用的靶細胞幾乎相同，刺激受累關(guān)節內的滑膜和軟骨，促進(jìn)合成PGE2和膠原酶，從而進(jìn)一步引起骨質(zhì)和軟骨的吸收，關(guān)節內的組織如關(guān)節軟骨、骨質(zhì)、滑膜破壞，并促進(jìn)成纖維細胞增生。TNF-α可以增加巨噬細胞自身生成，促進(jìn)IL-1β的合成。通過(guò)實(shí)驗證實(shí):高劑量丹皮酚可以明顯降低TNF-α的水平，在RA后期高劑量丹皮酚還可以控制病情的進(jìn)展，高劑量丹皮酚與RA密切相關(guān)。
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