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衛生資格《檢驗技士》預習資料:免疫電泳技術(shù)
免疫電泳技術(shù)原理
免疫電泳技術(shù)實(shí)質(zhì)上是在直流電場(chǎng)作用下的凝膠擴散試驗。它的原理是將凝膠擴散置于直流電場(chǎng)中,在一定的條件下,抗原及抗體離解成為帶正電或負電的電子,在電場(chǎng)中向異相電荷的電極移動(dòng),所帶凈電荷量越多、顆粒越小,泳動(dòng)速度越快,反之則慢。由于電流加速了抗原、抗體的運行速度,縮短了兩者結合的時(shí)間,加快了沉淀現象的產(chǎn)生。當有多種帶電荷的物質(zhì)電泳時(shí),由于靜電荷不同,而區分成不同區帶,使抗原決定簇不同的成分得以區分。
影響因素有:①電場(chǎng)強度;②溶液pH;③離子強度;④電滲等。
總補體溶血活性影響因素
【參考范圍】比色法:60~120kU/L.
【影響因素】
1.在補體測定中標本采集與保存極為重要,即待檢標本要新鮮。一般靜脈取血后,置室溫1h使血液凝固,分離血清后最好2h之內檢測完畢,否則應盡快置-20℃保存,避免反復凍溶,以防補體活性降低。
2.補體活性不甚穩定,56℃30min、劇烈振蕩、酸堿、乙醇、乙醚、肥皂、蛋白酶等均可使其滅活,因此檢測所用器皿要潔凈并呈中性。
3.該實(shí)驗影響因素較多,操作要嚴格,溶血素、綿羊紅細胞等配制要準確。
【臨床意義】補體是存在于正常人和脊椎動(dòng)物新鮮血清中的一組不耐熱、經(jīng)活化后具有酶活性的復雜球蛋白,統稱(chēng)為補體系統,目前已發(fā)現該系統包含有30多種可溶性蛋白和膜結合蛋白,其中大部分由肝臟和脾臟中的巨噬細胞合成。補體是機體重要的防御因子,廣泛參與抗微生物防御反應及免疫調節,能與任何一種抗原-抗體復合物結合并被激活,產(chǎn)生溶解靶細胞、促進(jìn)吞噬、清除免疫復合物、參與炎癥反應等一系列生物活性反應,同時(shí)也可介導變態(tài)反應及自身免疫性疾病的病理?yè)p傷。
1.CH50升高常見(jiàn)于各種急性期反應,如急性炎癥(風(fēng)濕熱急性期、結節性動(dòng)脈炎、皮肌炎、傷寒、麻疹、黑熱病、肺炎、急性心肌梗死、甲狀腺炎、阻塞性黃疸)、組織損傷、惡性腫瘤特別是肝癌等可較正常高2~3倍。
2.CH50降低補體消耗增加見(jiàn)于血清病、鏈球菌感染后腎小球腎炎、SLE、冷球蛋白血癥、自身免疫性溶血性貧血、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎、移植排斥反應等;補體大量喪失見(jiàn)于腎病綜合征、大面積燒傷、外傷、手術(shù)和失血過(guò)多;補體合成不足見(jiàn)于肝硬化、慢活肝、急性肝炎重癥患者等。
3.判斷補體檢測結果時(shí)應注意動(dòng)態(tài)觀(guān)察,最好數種補體成分同時(shí)檢測,以便對患者病情進(jìn)行綜合分析。
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