- 相關(guān)推薦
2017年公衛執業(yè)醫師《醫學(xué)微生物學(xué)》弧菌屬知識
弧菌屬(Vibrio)細菌是一大群菌體短小，彎曲成弧形的革蘭陰性菌，本菌屬與腸桿菌科的主要不同點(diǎn)是氧化酶試驗陽(yáng)性(麥契尼可夫弧菌除外)和有一根位于菌體一端的單鞭毛�；【鷮偈枪l執業(yè)醫師考試醫學(xué)微生物學(xué)的知識點(diǎn)。下面是yjbys小編為大家帶來(lái)的關(guān)于弧菌屬的知識，歡迎閱讀。
第一節 霍亂弧菌
霍亂弧菌(V.cholerae)是引起烈性傳染病霍亂的病原體，二千多年前已有記載。自1817年以來(lái)，已發(fā)生過(guò)7次世界性霍亂大流行，前6次均由霍亂弧菌古典生物型引起，1961年開(kāi)始的第7次大流行由霍亂弧菌El Tor生物型引起。1992年一個(gè)新的流行株O139(Bengal)在沿孟加拉彎的印度和孟加拉一些城市出現，并很快傳遍亞洲，這是首次由非O1群霍亂弧菌引起的流行。
一、生物學(xué)性狀
形態(tài)與染色 霍亂弧菌菌體大小為0.5～0.8´1.5~3mm。從病人新分離出的細菌形態(tài)典型，呈弧型或逗點(diǎn)狀(圖10-1)。但經(jīng)人工培養后，細菌常呈桿狀而不易與腸道桿菌區別。革蘭染色陰性。特殊結構有菌毛，無(wú)芽胞，有些菌株(包括O139)有莢膜，在菌體一端有一根單鞭毛。若取病人米泔水樣糞便或培養物作懸滴觀(guān)察，細菌運動(dòng)非�；顫�，呈穿梭樣或流星狀。
培養特性與生化反應 兼性厭氧，營(yíng)養要求不高。生長(cháng)繁殖的溫度范圍廣(18~37°)，故可在外環(huán)境中生存。耐堿不耐酸，在pH8.8~9.0的堿性蛋白胨水或堿性瓊脂平板上生長(cháng)良好，因其它細菌在此pH中不易生長(cháng)，故初次分離霍亂弧菌常用堿性蛋白胨水增菌�；魜y弧菌可在無(wú)鹽環(huán)境中生長(cháng)，而其它致病性弧菌則不能�；魜y弧菌為過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性，氧化酶陽(yáng)性，能發(fā)酵很多常見(jiàn)的單糖、雙糖和醇糖，如葡萄糖、蔗糖和甘露醇，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;不分解阿拉伯膠糖;能還原硝酸鹽，吲哚反應陽(yáng)性。
抗原構造與分型 霍亂弧菌有耐熱的0抗原和不耐熱的H抗原。根據0抗原不同，現已有155個(gè)血清群，其中O1群、O139群引起霍亂，其余的血清群分布于地面水中，可引起人類(lèi)胃腸炎等疾病，但從未引起霍亂的流行。H抗原無(wú)特異性，免疫擴散試驗表明所有霍亂弧菌擁有相同的H抗原。
O1群霍亂弧菌根據其菌體抗原由3種抗原因子A、B、C組成，又可分為3個(gè)血清型：小川型(Ogawa)、稻葉型( Inaba)、和彥島型(Hikojima)(表10-1)。
表10-1 霍亂弧菌O1群血清型
|
#FormatImgID_0# 血清型（抗原組分） |
O1多克隆抗體 |
O1單克隆抗體 A B C |
出現頻率 |
造成流行 |
||
|
小川型（AB） |
+ |
+ |
+ |
- |
常見(jiàn) |
是 |
|
稻葉型（AC） |
+ |
+ |
- |
+ |
常見(jiàn) |
是 |
|
彥島型（ABC） |
+ |
+ |
+ |
+ |
極少見(jiàn) |
未知 |
“+” 凝集; “-”不凝集
根據表型差異，O1群霍亂弧菌的每一個(gè)血清型還可分為2個(gè)生物型，即古典生物型(classical biotype)和El Tor生物型(El Tor biotype)因在埃及西奈半島El Tor檢疫站首次分離出而命名)。古典生物型不溶解羊紅細胞，不凝集雞紅細胞，對50IU的多粘菌素敏感，可被第IV群噬菌體裂解，而El Tor弧菌則完全相反。
O139群在抗原性方面與O1群之間無(wú)交叉，序列分析發(fā)現O139群失去了O1群的0抗原基因，出現了一個(gè)約36 kb的新基因，編碼與O1群不同的脂多糖抗原和莢膜多糖抗原，但與O22和O155等群可產(chǎn)生抗原性交叉。在遺傳性方面，如核糖型，限制性酶切電泳圖譜，外膜蛋白，毒性基因等則與O1群的古典型和El Tor生物型的流行株相似。
抵抗力 El Tor生物型和其它非01群霍亂弧菌在外環(huán)境中的生存力較古典型為強，在河水、井水及海水中可存活1~3周，有時(shí)還可越冬。本菌不耐酸，在正常胃酸中僅能存活4分鐘。55°C濕熱15分鐘，100°C煮沸1~2分鐘，0.5ppm氯15分鐘能殺死霍亂弧菌。以1：4比例加漂白粉處理病人排泄物或嘔吐物,經(jīng)1小時(shí)可達到消毒目的。
二、 致病性
致病物質(zhì) 霍亂弧菌的致病物質(zhì)涉及到染色體上多個(gè)基因，它們主要包括由ToxR蛋白調控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基因，另外還有二個(gè)不受ToxR蛋白調控的毒力因子基因hlyA和hap。
1.霍亂腸毒素 是目前已知的致瀉毒素中最為強烈的毒素，是腸毒素的典型代表。由一個(gè)A亞單位(分子量為27.2kDa)和5個(gè)相同的B亞單位(每個(gè)亞單位分子量為11.7kDa)構成的一個(gè)熱不穩定性多聚體蛋白，分別由結構基因ctx(cholera toxin)A和ctxB編碼。ctxAB操縱子位于染色體上稱(chēng)作核心區的部位，核心區的兩端為重復序列(RS1)�；魜y弧菌古典生物型染色體上廣泛散布著(zhù)以2拷貝ctx為一組的CTX單元，。El Tor生物型染色體上CTX則為多拷貝隨機分布。B亞單位可與小腸粘膜上皮細胞GM1神經(jīng)節苷脂受體結合，介導A亞單位進(jìn)入細胞，A亞單位在發(fā)揮毒性作用前需經(jīng)蛋白酶作用裂解為A1和A2兩條多肽。A1作為腺苷二磷酸核糖基轉移酶可使NAD(輔酶I)上的腺苷二磷酸核糖轉移到G蛋白上，稱(chēng)GS，GS的活化可使細胞內cAMP水平升高，主動(dòng)分泌Na+、K+、HCO3—和水，導致嚴重的腹瀉與嘔吐。
此外，在ctx操縱子上游還存在兩個(gè)編碼毒性相關(guān)的zot (zonula occludens toxin ，小帶聯(lián)結毒素) 、ace (accessory cholera enterotoxin)基因。在實(shí)驗兔中，其編碼產(chǎn)物Zot能增加腸粘膜的通透性;Ace使結扎的回腸段中液體聚積。志愿者口服ctxAB缺失的基因工程變異株產(chǎn)生的輕度腹瀉可能與這二個(gè)毒性基因有關(guān)。
2.鞭毛、菌毛及其它毒力因子 霍亂弧菌活潑的'鞭毛運動(dòng)有助于細菌穿過(guò)腸粘膜表面粘液層而接近腸壁上皮細胞。細菌的普通菌毛是細菌定居于小腸所必須的因子。只有粘附定居后方可致病。與此相關(guān)基因有acf和 tcpA。acf (accessory colonization factor) 編碼粘附素; tcpA (toxin coregulated pilus A) 編碼菌毛蛋白中一個(gè)分子量為20.5kDa的重要亞單位。實(shí)驗發(fā)現使tcp失活后，變異株即失去定居功能和致瀉特性。其他毒力因子還有hlyA(hemolytic-cytolytic A)基因編碼的具有溶血-溶細胞的蛋白;hap(hemagglutinin/protease)基因編碼的有助于細菌從死亡細胞上解離的血凝素/蛋白酶。
O139群除具有上述O1群的致病物質(zhì)和相關(guān)基因外，還存在多糖莢膜和特殊LPS毒性決定簇，其功能是抵抗血清中殺菌物質(zhì)和能粘附到小腸粘膜上，不表達LPS決定簇和莢膜的TnphoA突變株則對血清易感。
所致疾病 引起烈性腸道傳染病霍亂，為我國的甲類(lèi)法定傳染病。在自然情況下，人類(lèi)是霍亂弧菌的唯一易感者。在地方性流行區，除病人外，無(wú)癥狀感染者也是重要傳染源。傳播途徑主要是通過(guò)污染的水源或食物經(jīng)口攝入，人與人之間的直接傳播不常見(jiàn)。在正常胃酸條件下，需要進(jìn)入大量的細菌(108 )方能引起感染，但當胃酸低時(shí)，感染劑量可減少到103~105個(gè)細菌。病菌到達小腸后，粘附于腸粘膜表面并迅速繁殖，不侵入腸上皮細胞和腸腺，細菌在繁殖過(guò)程中產(chǎn)生腸毒素而致病。O1群霍亂弧菌感染可從無(wú)癥狀或輕型腹瀉到嚴重的致死性腹瀉，霍亂弧菌古典生物型所致疾病較El tor生物型嚴重。典型病例一般在吞食細菌后2~3天突然出現劇烈腹瀉和嘔吐，在疾病最嚴重時(shí)，每小時(shí)失水量可高達1升，排出如米泔水樣腹瀉物。由于大量水分和電解質(zhì)喪失而導致失水，代謝性酸中毒，低堿血癥和低容量性休克及心力不齊和腎衰竭，如未經(jīng)治療處理，病人死亡率高達60%，但若及時(shí)給病人補充液體及電解質(zhì)，死亡率可小于1%。O139群霍亂弧菌感染比O1群嚴重，表現為嚴重脫水和高死亡率，又成人病例所占比例較高〈70%，而O1群霍亂弧菌流行高峰期，兒童病例約占60%。
病愈后一些患者可短期帶菌，一般不超過(guò)2周，個(gè)別El Tor型病例病后可帶菌長(cháng)達數月或數年之久。病菌主要存在于膽囊中。
三、免疫性
對O1群霍亂弧菌感染的研究和歷次霍亂流行的觀(guān)察，表明感染霍亂弧菌后，機體可獲得牢固免疫力，再感染少見(jiàn)。病人發(fā)病數月后，血液中和腸腔中可出現保護性的抗腸毒素抗體及抗菌抗體，抗腸毒素抗體主要針對霍亂毒素B亞單位，抗菌抗體主要針對O抗原。腸腔中的sIgA可凝集粘膜表面的病菌，使其失去動(dòng)力;可與菌毛等粘附因子結合，阻止霍亂弧菌粘附至腸粘膜上皮細胞;可與霍亂腸毒素B亞單位結合，阻斷腸毒素與小腸上皮細胞受體作用�；魜y弧菌引起的腸道局部粘膜免疫是霍亂保護性免疫的基礎。
感染O139群的病人大多為成年人，表明以前感染O1群獲得的免疫對O139群感染無(wú)交叉保護作用。O139群感染后的免疫應答與O1群基本一致。家兔腸道結扎實(shí)驗和小鼠攻擊實(shí)驗證明，O139群的保護性免疫以針對脂多糖和莢膜多糖的抗菌免疫為主，抗毒素免疫為輔。O1群的脂多糖O抗原與O139群存在顯著(zhù)差異，且還缺少莢膜多糖表面抗原，故其引起的免疫不能交叉保護O139群的感染。
四、微生物學(xué)檢查法
霍亂是烈性傳染病，對首例病人的病原學(xué)診斷應快速、準確，并及時(shí)作出疫情報告。
標本 病人糞便，肛拭;流行病學(xué)調查還包括水樣�；魜y弧菌不耐酸和干燥。為避免因糞便發(fā)酵產(chǎn)酸而使病菌滅活，標本應及時(shí)培養或放入Cary-Blair保存液中運輸;腸道病原菌常用的甘油鹽水緩沖保存液不適宜。
直接鏡檢 革蘭染色陰性弧菌，懸滴法觀(guān)察細菌呈穿梭樣運動(dòng)有助于診斷。
分離培養 常將標本首先接種至堿性蛋白胨水增菌，37°C孵育6-8小時(shí)后直接鏡檢并作分離培養。目前常用的選擇培養基為T(mén)CBS，該培養基含有硫代硫酸鹽、枸櫞酸鹽、膽鹽及蔗糖，霍亂弧菌因分解蔗糖呈黃色菌落。挑選可疑菌落進(jìn)行生化反應及與O1群多價(jià)和單價(jià)血清作玻片凝集反應。目前還需與O139群抗血清做凝集反應。其它分離培養基還有堿性平板、血平板和TTGA培養基等。
五、防治原則
改善社區環(huán)境，加強水源管理;培養良好個(gè)人衛生習慣，不生食貝殼類(lèi)海產(chǎn)品等是預防霍亂弧菌感染和流行的重要措施。
疫苗預防長(cháng)期以來(lái)使用O1群霍亂弧菌死菌苗肌肉注射，雖可增強人群的特異性免疫力，但保護力僅為50%左右，且血清抗體持續時(shí)間較短，僅為3~6個(gè)月。在認識到腸道局部免疫對霍亂預防起主要作用后，目前霍亂疫苗預防的重點(diǎn)已轉至研制口服菌苗的方向上，包括B亞單位-全菌滅活口服疫苗、基因工程減毒活菌苗(用基因工程技術(shù)去除O1群霍亂弧菌野生株DNA中大部分毒力基因的活疫苗)、帶有霍亂弧菌幾個(gè)主要保護性抗原的基因工程疫苗等。其中前兩種疫苗已進(jìn)行過(guò)大規模人群試驗，對其有效保護率和保護時(shí)間正在進(jìn)行評估，且在某些國家已獲準使用。0139尚無(wú)預防性疫苗，候選菌苗正在研制中，思路是制成包括預防O1群和O139群霍亂弧菌感染的二價(jià)菌苗。
及時(shí)補充液體和電解質(zhì)，預防大量失水導致的低血容量性休克和酸中毒是治療霍亂的關(guān)鍵;抗生素的使用可減少外毒素的產(chǎn)生，加速細菌的清除，用于霍亂的抗菌藥物有四環(huán)素、強力霉素、呋喃唑酮、氯霉素和復方SMZ-TMP等。但帶有多重耐藥質(zhì)粒的菌株在增加;且O139群的耐藥性強于O1群，給治療帶來(lái)一定困難。
第二節 副溶血性弧菌
副溶血性弧菌(V。parahemolyticus)于1950年從日本一次暴發(fā)性食物中毒中分離發(fā)現。該菌存在于近海的海水、海底沉積物和魚(yú)類(lèi)、貝殼等海產(chǎn)品中。根據菌體O抗原不同，現已有13個(gè)血清群。主要引起食物中毒，尤以日本、東南亞、美國及我國臺北地區多見(jiàn)，也是我國大陸沿海地區食物中毒中最常見(jiàn)的一種病原菌。
生物學(xué)特性 同其它引起人類(lèi)感染的弧菌種類(lèi)一樣，該菌與霍亂弧菌的一個(gè)顯著(zhù)差別是嗜鹽(halophilic)，在培養基中以含3.5%NaCl最為適宜，無(wú)鹽則不能生長(cháng)，但當NaCl濃度高于 8%時(shí)也不能生長(cháng)。在鹽濃度不適宜的培養基中，細菌呈長(cháng)桿狀或球桿狀等多形態(tài)。不耐熱，90°C1分鐘即被殺死;不耐酸，1%醋酸或50%食醋中1分鐘死亡。
副溶血性弧菌在普通血平板(含羊、兔或馬等血液)上不溶血或只產(chǎn)生a溶血。但在特定條件下，某些菌株在含高鹽(7%)的、人O型血或兔血及以D-甘露醇作為炭源的我妻(Wagatsuma)瓊脂平板上可產(chǎn)生b溶血，稱(chēng)為神奈川現象(Kanagawa phenomenon,KP)。日本學(xué)者檢測了3370株副溶血性弧菌，來(lái)自病人的菌株中96.5%為KP+，而來(lái)自海產(chǎn)品及海水的菌株僅1%陽(yáng)性。
致病性 引起食物中毒的確切致病機制尚待闡明。KP+菌株為致病性菌株基本肯定�，F已從KP+菌株分離出二種致病因子，其一為耐熱直接溶血素(thermostable direct hemolysin ,TDH),動(dòng)物實(shí)驗表明具有細胞毒和心臟毒兩種作用。其基因為雙拷貝(tdh1和tdh2)，KP實(shí)驗中的溶血現象即由tdh2位點(diǎn)決定。最近的研究還表明，tdh基因家族也廣泛存在于人類(lèi)致病性弧菌中，如大多數霍利斯弧菌菌株(V.hollisae)，某些擬態(tài)弧菌菌株(V.mimicus)中有tdh基因，非O1群霍亂弧菌中也存在同源性約為93%~96%的tdh相關(guān)基因，提示該基因與致病關(guān)系密切。另一個(gè)致病因子為耐熱相關(guān)溶血素( thermostable related hemolysin TRH)生物學(xué)功能與TDH相似，其基因與 tdh同源性為68%。
其它致病物質(zhì)可能還包括粘附素和粘液素酶。
該菌引起的食物中毒經(jīng)烹飪不當的海產(chǎn)品或鹽腌制品所傳播。常見(jiàn)的為海蟄、海魚(yú)、海蝦及各種貝類(lèi)，因食物容器或砧板生熟不分污染本菌后，也可發(fā)生食物中毒。該病常年均可發(fā)生，潛伏期5~72小時(shí)，平均24小時(shí)，可從自限性腹瀉至中度霍亂樣病癥，有腹痛、腹瀉、嘔吐和低熱，糞便多為水樣，少數為血水樣，恢復較快，病后免疫力不強，可重復感染。
該菌還可引起淺表創(chuàng )傷感染、敗血癥等。
診斷與防治
標本采取患者糞便、肛拭或剩余食物，直接分離培養于SS瓊脂平板或嗜鹽菌選擇平板。如出現可疑菌落，進(jìn)一步作嗜鹽性試驗與生化反應，最后用診斷血清進(jìn)行鑒定。最近已發(fā)展了基因探針雜交及PCR快速診斷法，可直接從原始食物標本或腹瀉標本中檢測耐熱毒素基因。
治療可用抗菌藥物，如慶大霉素或復方SMZ -TMP，嚴重病例需輸液和補充電解質(zhì)。
例題：
1.細菌性痢疾的`病原體屬于
A、志賀菌屬
B、沙門(mén)菌屬
C、弧菌屬
D、彎曲菌屬
E、螺旋菌屬
2.細菌性痢疾散發(fā)流行的主要途徑是
A、集體食堂食物被污染造成經(jīng)口感染
B、井水、池塘或供水系統被污染造成經(jīng)口感染
C、健康人的手或蔬菜、瓜果等食物被污染造成經(jīng)口感染
D、與病人密切接觸經(jīng)呼吸道傳染
E、接觸病人的血液經(jīng)傷口感染
3.痢疾桿菌的主要致病因素是
A、吞入細菌數量
B、外毒素
C、神經(jīng)毒素
D、侵襲力和內毒素
E、腸毒素
參考答案
1.A 2.C 3.D
【公衛執業(yè)醫師《醫學(xué)微生物學(xué)》弧菌屬知識】相關(guān)文章：
公衛執業(yè)醫師考點(diǎn)：醫學(xué)模式的演變03-26
2017年公衛執業(yè)醫師《醫學(xué)微生物學(xué)》厭氧性細菌知識03-08
公衛執業(yè)醫師考點(diǎn)03-05
2017公衛執業(yè)醫師考試《醫學(xué)微生物學(xué)》基礎題及答案01-22
2017公衛執業(yè)醫師考試《醫學(xué)微生物學(xué)》模擬試題及答案01-23
公衛執業(yè)醫師考試土壤衛生知識03-08